Przejdź do treści
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy
Miejsce przerzutów
Szpik kostny
Synonimy
H2195, H-2195

Dokumenty

NCI-H2195

Cell line · Numer produktu 305259

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NCI-H2195 pochodzi z ludzkiego raka drobnokomórkowego płuc (SCLC). W szczególności, ta linia komórkowa została utworzona z przerzutów do szpiku kostnego dorosłego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuc. Komórki NCI-H2195 charakteryzują się nabłonkową morfologią i zdolnością do przylegania w hodowli. Wykazują typowe cechy SCLC, w tym obecność markerów neuroendokrynnych i mutacji genetycznych powszechnie związanych z tą agresywną postacią raka płuc.

Komórki NCI-H2195 są szeroko wykorzystywane w badaniach nad rakiem do badania molekularnych i komórkowych mechanizmów drobnokomórkowego raka płuc. Obejmuje to badania szlaków związanych ze wzrostem guza, przerzutami i odpowiedzią na terapię. Naukowcy wykorzystują tę linię komórkową do badania wpływu środków chemioterapeutycznych, terapii celowanych i nowych strategii leczenia SCLC. Linia komórkowa NCI-H2195 jest szczególnie cenna do badania zmian genetycznych i epigenetycznych, które napędzają SCLC, takich jak mutacje w TP53, RB1 i MYC, które są często obserwowane w tym typie raka.

Ponadto linia komórkowa NCI-H2195 służy jako model do badań przedklinicznych mających na celu identyfikację biomarkerów do wczesnego wykrywania, prognozowania i odpowiedzi terapeutycznej w drobnokomórkowym raku płuc. Zapewniając niezawodny system in vitro, ta linia komórkowa przyczynia się do rozwoju skuteczniejszych metod leczenia i lepszego zrozumienia choroby, ostatecznie pomagając w rozwoju spersonalizowanych metod medycznych dla pacjentów z SCLC.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy
Miejsce przerzutów
Szpik kostny
Synonimy
  • H2195
  • H-2195

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
NCI-H2195 (numer katalogowy Cytion 305259)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 1,6 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę o 10% FBS, ITS+, Hydrocortison 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutaminę
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
67 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski