Přejít na obsah
Tkáň
Plíce
Nemoc
Malobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
H2195, H-2195

Dokumenty

NCI-H2195

Cell line · Číslo výrobku 305259

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie NCI-H2195 je odvozena od lidského malobuněčného karcinomu plic (SCLC). Konkrétně byla tato buněčná linie vytvořena z metastáz kostní dřeně dospělého pacienta s malobuněčným karcinomem plic. Buňky NCI-H2195 se vyznačují epiteliální morfologií a schopností růst adherentně v kultuře. Vykazují typické znaky SCLC, včetně přítomnosti neuroendokrinních markerů a genetických mutací běžně spojených s touto agresivní formou karcinomu plic.

Buňky NCI-H2195 jsou hojně využívány ve výzkumu rakoviny ke studiu molekulárních a buněčných mechanismů malobuněčného karcinomu plic. Patří sem i zkoumání cest, které se podílejí na růstu nádoru, metastazování a odpovědi na léčbu. Vědci využívají tuto buněčnou linii ke zkoumání účinků chemoterapeutik, cílených terapií a nových léčebných strategií na SCLC. Buněčná linie NCI-H2195 je zvláště cenná pro studium genetických a epigenetických změn, které jsou příčinou vzniku SCLC, jako jsou mutace v TP53, RB1 a MYC, které se u tohoto typu rakoviny často vyskytují.

Buněčná linie NCI-H2195 navíc slouží jako model pro preklinické studie zaměřené na identifikaci biomarkerů pro včasnou detekci, prognózu a léčebnou odpověď u malobuněčného karcinomu plic. Tím, že tato buněčná linie poskytuje spolehlivý systém in vitro, přispívá k vývoji účinnějších léčebných postupů a lepšímu pochopení tohoto onemocnění, což v konečném důsledku napomáhá rozvoji přístupů personalizované medicíny pro pacienty s SCLC.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Malobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
  • H2195
  • H-2195

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
NCI-H2195 (katalogové číslo Cytion 305259)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 1,6 mM L-glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS, ITS+, hydrokortizon 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutamin
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
67 let
Etnická příslušnost
Kavkazský