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Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de pequenas células
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
H2195, H-2195

Documentos

NCI-H2195

Cell line · Número do produto 305259

€550.00sem impostos nem portes de envio
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Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular NCI-H2195 é derivada do carcinoma de pequenas células (SCLC) do pulmão humano. Especificamente, esta linha celular foi estabelecida a partir de metástases da medula óssea de um doente adulto com carcinoma pulmonar de pequenas células. As células NCI-H2195 são caracterizadas pela sua morfologia epitelial e pela sua capacidade de crescimento aderente em cultura. Apresentam caraterísticas típicas de SCLC, incluindo a presença de marcadores neuroendócrinos e mutações genéticas normalmente associadas a esta forma agressiva de cancro do pulmão.

As células NCI-H2195 são amplamente utilizadas na investigação do cancro para estudar os mecanismos moleculares e celulares do carcinoma do pulmão de pequenas células. Isto inclui investigações sobre as vias envolvidas no crescimento do tumor, metástases e resposta à terapêutica. Os investigadores utilizam esta linha celular para explorar os efeitos dos agentes quimioterapêuticos, das terapias direcionadas e das novas estratégias de tratamento do SCLC. A linha de células NCI-H2195 é particularmente valiosa para o estudo das alterações genéticas e epigenéticas que impulsionam o CPPC, tais como as mutações em TP53, RB1 e MYC, que são frequentemente observadas neste tipo de cancro.

Além disso, a linha celular NCI-H2195 serve de modelo para estudos pré-clínicos destinados a identificar biomarcadores para a deteção precoce, o prognóstico e a resposta terapêutica no carcinoma do pulmão de pequenas células. Ao fornecer um sistema in vitro fiável, esta linha celular contribui para o desenvolvimento de tratamentos mais eficazes e para uma melhor compreensão da doença, ajudando, em última análise, no avanço das abordagens de medicina personalizada para os doentes com CPPC.

Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma de pequenas células
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
  • H2195
  • H-2195

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Identificadores

Referência
NCI-H2195 (número de catálogo Cytion 305259)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glicose, w: 1,6 mM L-Glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM Piruvato de sódio, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, ITS+, Hydrocortison 10 nM, β-estradiol 10 nM, L-glutamin
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
67 anos
Etnia
Caucasiano