Mine otse sisu juurde
Kude
Kopsud
Haigus
Väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
H2195, H-2195

Dokumendid

NCI-H2195

Cell line · Toote number 305259

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H2195 rakuliin on saadud inimese kopsu väikerakk-kartsinoomist (SCLC). Konkreetselt on see rakuliin loodud ühe täiskasvanud kopsu väikerakk-kartsinoomiga patsiendi luuüdi metastaasidest. NCI-H2195 rakke iseloomustab nende epiteliaalne morfoloogia ja võime kasvada kultuuris adherentselt. Neil on SCLC tüüpilised tunnused, sealhulgas neuroendokriinsed markerid ja geneetilised mutatsioonid, mida tavaliselt seostatakse selle agressiivse kopsuvähi vormiga.

NCI-H2195 rakke kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, et uurida väikerakk-kopsukartsinoomi molekulaarseid ja rakumehhanisme. See hõlmab kasvajate kasvu, metastaaside tekkimise ja ravivastuse uurimise. Teadlased kasutavad seda rakuliini, et uurida kemoterapeutiliste ainete, sihtotstarbeliste ravimeetodite ja uute ravistrateegiate mõju SCLC-le. NCI-H2195 rakuliin on eriti väärtuslik SCLC-d põhjustavate geneetiliste ja epigeneetiliste muutuste, näiteks TP53, RB1 ja MYC mutatsioonide uurimiseks, mida seda tüüpi vähi puhul sageli täheldatakse.

Lisaks on rakuliin NCI-H2195 mudeliks prekliinilistes uuringutes, mille eesmärk on kindlaks teha biomarkerid väikerakk-kopsukartsinoomi varajaseks avastamiseks, prognoosimiseks ja ravivastuseks. Kuna see rakuliin pakub usaldusväärset in vitro süsteemi, aitab see kaasa tõhusamate ravimeetodite väljatöötamisele ja haiguse paremale mõistmisele, aidates lõppkokkuvõttes kaasa SCLC-patsientide personaliseeritud meditsiiniliste lähenemisviiside arendamisele.

Kude
Kopsud
Haigus
Väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
  • H2195
  • H-2195

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
NCI-H2195 (Cytioni katalooginumber 305259)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T): TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 1,6 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Keskkonda täiendatakse 10% FBS, ITS+, hüdrokortisooni 10 nM, β-östradiooli 10 nM, L-glutamiini
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
67 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia