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Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a piccole cellule
Sito metastatico
Midollo osseo
Sinonimi
H2195, H-2195

Documenti

NCI-H2195

Cell line · Codice prodotto 305259

€550.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare NCI-H2195 deriva dal carcinoma polmonare a piccole cellule (SCLC) umano. In particolare, questa linea cellulare è stata creata a partire dalle metastasi del midollo osseo di un paziente adulto con carcinoma polmonare a piccole cellule. Le cellule NCI-H2195 sono caratterizzate da una morfologia epiteliale e dalla capacità di crescere in modo aderente in coltura. Presentano caratteristiche tipiche del SCLC, tra cui la presenza di marcatori neuroendocrini e mutazioni genetiche comunemente associate a questa forma aggressiva di tumore polmonare.

Le cellule NCI-H2195 sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro per studiare i meccanismi molecolari e cellulari del carcinoma polmonare a piccole cellule. Ciò include indagini sulle vie coinvolte nella crescita del tumore, nelle metastasi e nella risposta alla terapia. I ricercatori utilizzano questa linea cellulare per esplorare gli effetti di agenti chemioterapici, terapie mirate e nuove strategie di trattamento sul SCLC. La linea cellulare NCI-H2195 è particolarmente preziosa per studiare le alterazioni genetiche ed epigenetiche che guidano il SCLC, come le mutazioni in TP53, RB1 e MYC, che si osservano frequentemente in questo tipo di tumore.

Inoltre, la linea cellulare NCI-H2195 funge da modello per studi preclinici volti a identificare biomarcatori per la diagnosi precoce, la prognosi e la risposta terapeutica nel carcinoma polmonare a piccole cellule. Fornendo un sistema in vitro affidabile, questa linea cellulare contribuisce allo sviluppo di trattamenti più efficaci e a una migliore comprensione della malattia, favorendo in ultima analisi il progresso di approcci di medicina personalizzata per i pazienti affetti da SCLC.

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma a piccole cellule
Sito metastatico
Midollo osseo
Sinonimi
  • H2195
  • H-2195

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
NCI-H2195 (catalogo Cytion numero 305259)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 1,6 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 1,0 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (Cytion 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, ITS+, idrocortisone 10 nM, β-estradiolo 10 nM, L-glutammina
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
2 volte a settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
67 anni
Etnia
Caucasico