Премини към съдържанието
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
H2195, H-2195

Документи

NCI-H2195

Cell line · Номер на продукта 305259

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия NCI-H2195 е получена от човешки белодробен дребноклетъчен карцином (SCLC). По-конкретно, тази клетъчна линия е създадена от метастази в костния мозък на възрастен пациент с белодробен дребноклетъчен карцином. Клетките NCI-H2195 се характеризират с епителна морфология и способност да растат адхезивно в култура. Те проявяват типични характеристики на SCLC, включително наличие на невроендокринни маркери и генетични мутации, които обикновено се свързват с тази агресивна форма на белодробен рак.

Клетките NCI-H2195 се използват широко в раковите изследвания за изучаване на молекулярните и клетъчните механизми на дребноклетъчния белодробен карцином. Това включва изследвания на пътищата, свързани с растежа на тумора, метастазирането и отговора на терапията. Изследователите използват тази клетъчна линия, за да проучат въздействието на химиотерапевтичните агенти, целевите терапии и новите стратегии за лечение на SCLC. Клетъчната линия NCI-H2195 е особено ценна за изучаване на генетичните и епигенетичните промени, които обуславят SCLC, като например мутации в TP53, RB1 и MYC, които често се наблюдават при този вид рак.

Освен това клетъчната линия NCI-H2195 служи като модел за предклинични проучвания, насочени към идентифициране на биомаркери за ранно откриване, прогноза и терапевтичен отговор при дребноклетъчен белодробен карцином. Като предоставя надеждна in vitro система, тази клетъчна линия допринася за разработването на по-ефективни лечения и по-добро разбиране на заболяването, което в крайна сметка подпомага развитието на подходи за персонализирана медицина за пациенти с SCLC.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
  • H2195
  • H-2195

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Идентификатори

Източник
NCI-H2195 (каталожен номер 305259 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1538

04Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 1,6 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, ITS+, хидрокортизон 10 nM, β-естрадиол 10 nM, L-глутамин
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
67 години
Етническа принадлежност
Кавказки