Skip to content
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งชนิดเซลล์เล็ก
Metastatic site
ไขกระดูก
Synonyms
H2195, H-2195

Documents

NCI-H2195

Cell line · Product number 305259

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ NCI-H2195 มีต้นกำเนิดจากมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก (SCLC) ของมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สายเซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นจากมะเร็งที่แพร่กระจายไปยังไขกระดูกของผู้ป่วยผู้ใหญ่ที่เป็นมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็กเซลล์ NCI-H2195 มีลักษณะเด่นทางสัณฐานวิทยาเป็นเซลล์เยื่อบุผิวและมีความสามารถในการเจริญเติบโตแบบเกาะติดในวัฒนธรรมเซลล์ พวกมันแสดงลักษณะเฉพาะของ SCLC รวมถึงการมีตัวบ่งชี้ทางระบบประสาทและต่อมไร้ท่อ และการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมที่มักเกี่ยวข้องกับมะเร็งปอดชนิดรุนแรงนี้

เซลล์ NCI-H2195 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยมะเร็ง เพื่อศึกษาวิถีทางโมเลกุลและกลไกในระดับเซลล์ของมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก (small cell lung carcinoma) ซึ่งครอบคลุมถึงการตรวจสอบเส้นทางการเจริญเติบโตของเนื้องอก การแพร่กระจาย และการตอบสนองต่อการรักษา นักวิจัยใช้สายพันธุ์เซลล์นี้ในการศึกษาผลกระทบของยาเคมีบำบัด การรักษาแบบมุ่งเป้า และกลยุทธ์การรักษาใหม่ ๆ ที่มีต่อ SCLCสายพันธุ์เซลล์ NCI-H2195 มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมและอีพิเจเนติกที่กระตุ้นให้เกิด SCLC เช่น การกลายพันธุ์ใน TP53, RB1 และ MYC ซึ่งมักพบในมะเร็งชนิดนี้

นอกจากนี้ สายพันธุ์เซลล์ NCI-H2195 ยังทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาในระยะก่อนคลินิกที่มุ่งเน้นการระบุตัวบ่งชี้ทางชีวภาพสำหรับการตรวจพบในระยะเริ่มต้น การพยากรณ์โรค และการตอบสนองต่อการรักษาในมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก ด้วยการจัดหาระบบในหลอดทดลองที่เชื่อถือได้ สายพันธุ์เซลล์นี้มีส่วนช่วยในการพัฒนาการรักษาที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นและความเข้าใจที่ดีขึ้นเกี่ยวกับโรค ซึ่งในที่สุดจะช่วยให้ก้าวหน้าในการใช้วิธีการแพทย์เฉพาะบุคคลสำหรับผู้ป่วย SCLC

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งชนิดเซลล์เล็ก
Metastatic site
ไขกระดูก
Synonyms
  • H2195
  • H-2195

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
NCI-H2195 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305259)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1538

04Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: TP53, p.Val157Phe (c.469G>T)

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 1.6 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, ITS+, ไฮโดรคอร์ติโซน 10 นาโนโมลาร์, β-เอสตราไดออล 10 นาโนโมลาร์, แอล-กลูตามีน
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
67 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน