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HROG12 T0 M1
Tissu
Cerveau
Maladie
Glioblastome

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HROG12 T0 M1

Cell line · Référence du produit 300882

HROG12 T0 M1 est une lignée cellulaire humaine primaire de glioblastome multiforme (GBM) issue d'un tissu tumoral fraîchement prélevé chez un patient adulte chez qui on a diagnostiqué…

€800.00hors taxes et frais de port
Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

HROG12 T0 M1 est une lignée cellulaire primaire humaine de glioblastome multiforme (GBM) établie à partir de tissu tumoral fraîchement réséqué provenant d'un patient adulte diagnostiqué avec un glioblastome de grade IV selon la classification de l'OMS. La désignation « T0 » indique que l'échantillon a été prélevé lors de l'intervention chirurgicale initiale, tandis que « M1 » fait référence au modèle in vitro correspondant dérivé de cette tumeur primaire. La lignée cellulaire a été générée au sein de la plateforme modèle HROG (Hansestadt Rostock Glioma), qui se concentre sur l'établissement de cultures de gliomes à passage ultra-faible qui conservent les caractéristiques moléculaires et biologiques spécifiques au patient.

HROG12 T0 M1 présente une croissance adhérente dans des conditions de culture standard et affiche une morphologie de type fibroblastique typique des cultures primaires de GBM. La caractérisation immunophénotypique des lignées cellulaires dérivées de HROG démontre l'expression de marqueurs de lignées neurales et gliales tels que la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), la nestine et la vimentine, ce qui confirme l'origine astrocytaire de la tumeur. Au sein de la collection HROG, le profilage moléculaire comprend l'évaluation de biomarqueurs cliniquement pertinents tels que la méthylation du promoteur MGMT, le statut d'amplification de l'EGFR et l'analyse mutationnelle de gènes tels que TP53, IDH1/2, KRAS et BRAF, confirmant la préservation des altérations génomiques associées à la tumeur dans les cultures à passage précoce.

Le modèle HROG12 T0 M1 a été utilisé pour l'évaluation in vitro des réponses thérapeutiques aux traitements standard du glioblastome, y compris les agents alkylants, ainsi qu'aux thérapies ciblées expérimentales. Les analyses comparatives entre les modèles HROG indiquent une morphologie stable, une cinétique de croissance reproductible et des profils de sensibilité aux médicaments cohérents dans les passages précoces. En tant que modèle de glioblastome à faible passage dérivé de patients, HROG12 T0 M1 fournit une plateforme cliniquement pertinente pour étudier la biologie tumorale, l'hétérogénéité moléculaire et les mécanismes de résistance thérapeutique dans les gliomes de haut grade.

Tissu
Cerveau
Maladie
Glioblastome

02Classification

Organisme
Humain
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
HROG12 T0 M1 (numéro de catalogue Cytion 300882)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FR

04Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons 50 % de milieu basal + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui contient des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

06Donateur

Origine ethnique
Caucasien