Gå direkte til indholdet
HROG12 T0 M1
Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom

Dokumenter

HROG12 T0 M1

Cell line · Varenummer 300882

HROG12 T0 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje, der er etableret ud fra friskresekteret tumorvæv fra en voksen patient, der var blevet diagnosticeret med ...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HROG12 T0 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje, der er etableret ud fra frisk resekteret tumorvæv fra en voksen patient diagnosticeret med WHO-grad IV glioblastoma. Betegnelsen "T0" angiver, at prøven blev udtaget ved den første kirurgiske indgreb, mens "M1" henviser til den tilsvarende in vitro-model, der er afledt af denne primære tumor. Cellelinjen blev genereret inden for HROG-modelplatformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserer på at etablere gliomkulturer med ultralav passage, der bevarer patientspecifikke molekylære og biologiske egenskaber.

HROG12 T0 M1 udviser adhærent vækst under standardkulturforhold og viser en fibroblastlignende morfologi, der er typisk for primære GBM-kulturer. Immunofenotypisk karakterisering af HROG-afledte cellelinjer viser ekspression af neurale og gliale linjemarkører såsom glial fibrillært surt protein (GFAP), nestin og vimentin, hvilket understøtter astrocytisk tumoroprindelse. Inden for HROG-samlingen omfatter molekylær profilering vurdering af klinisk relevante biomarkører såsom MGMT-promotor-methylering, EGFR-amplifikationsstatus og mutationsanalyse af gener, herunder TP53, IDH1/2, KRAS og BRAF, hvilket bekræfter bevarelsen af tumorassocierede genomiske ændringer i tidlige passage-kulturer.

HROG12 T0 M1 er blevet anvendt til in vitro-evaluering af terapeutiske responser på standardbehandlinger af glioblastom, herunder alkylerende midler, samt undersøgte målrettede terapier. Sammenlignende analyser på tværs af HROG-modeller indikerer stabil morfologi, reproducerbar vækstkinetik og konsistente lægemiddelfølsomhedsprofiler i tidlige passager. Som en patientafledt glioblastom-model med lav passage giver HROG12 T0 M1 en klinisk relevant platform til at studere tumorbiologi, molekylær heterogenitet og mekanismer for terapeutisk resistens i højgradig gliom.

Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom

02Klassificering

Organisme
Menneske
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HROG12 T0 M1 (Cytion katalognummer 300882)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FR

04Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

06Donor

Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk