Перейти до вмісту
HROG12 T0 M1
Тканина
Мозок
Хвороба
Гліобластома

Документи

HROG12 T0 M1

Cell line · Номер товару 300882

HROG12 T0 M1 — це первинна клітинна лінія мультиформної гліобластоми (GBM) людини, отримана зі свіжовидаленої пухлинної тканини дорослого пацієнта, у якого було діагностовано...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

HROG12 T0 M1 — це первинна клітинна лінія мультиформної гліобластоми (GBM) людини, створена з нещодавно видаленої пухлинної тканини дорослого пацієнта, у якого діагностовано гліобластому IV ступеня за класифікацією ВООЗ. Позначення «T0» вказує на те, що зразок був отриманий під час первинного хірургічного втручання, а «M1» позначає відповідну in vitro модель, отриману з цієї первинної пухлини. Клітинна лінія була створена в рамках модельної платформи HROG (Hansestadt Rostock Glioma), яка зосереджується на створенні культур гліом з наднизьким пасажем, що зберігають молекулярні та біологічні характеристики, специфічні для пацієнта.

HROG12 T0 M1 демонструє адгезивне зростання в стандартних умовах культивування та має фібробластоподібну морфологію, типову для первинних культур ГБМ. Імунофенотипна характеристика клітинних ліній, отриманих з HROG, демонструє експресію маркерів нервового та гліального походження, таких як гліальний фібрилярний кислий білок (GFAP), нестин та віментин, що підтверджує астроцитарне походження пухлини. У колекції HROG молекулярне профілювання включає оцінку клінічно значущих біомаркерів, таких як метилювання промотора MGMT, статус ампліфікації EGFR та мутаційний аналіз генів, включаючи TP53, IDH1/2, KRAS та BRAF, що підтверджує збереження пов'язаних з пухлиною геномних змін у культурах раннього пасажу.

HROG12 T0 M1 використовувався для in vitro оцінки терапевтичної відповіді на стандартні методи лікування гліобластоми, включаючи алкилуючі агенти, а також досліджувані цільові терапії. Порівняльний аналіз моделей HROG вказує на стабільну морфологію, відтворювану кінетику росту та послідовні профілі чутливості до ліків на ранніх етапах. Як модель гліобластоми з низьким пасажем, отримана від пацієнта, HROG12 T0 M1 забезпечує клінічно релевантну платформу для вивчення біології пухлин, молекулярної гетерогенності та механізмів терапевтичної резистентності у високодиференційованих гліомах.

Тканина
Мозок
Хвороба
Гліобластома

02Класифікація

Організм
Людина
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Ідентифікатори

Посилання
HROG12 T0 M1 (номер за каталогом Cytion 300882)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_B7FR

04Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо 50% базальне середовище + 40% FBS + 10% ДМСО або СМ-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для покращення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

06Донор

Етнічна приналежність
Кавказець