الانتقال إلى المحتوى
HROG12 T0 M1
الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

المستندات

HROG12 T0 M1

Cell line · رقم المنتج 300882

HROG12 T0 M1 هو خط خلوي أولي لورم دبقي متعدد الأشكال (GBM) بشري، تم إنشاؤه من نسيج ورمي تم استئصاله حديثًا من مريض بالغ تم تشخيصه بـ...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف

HROG12 T0 M1 هو خط خلايا ورم دبقي متعدد الأشكال (GBM) بشري أولي تم إنشاؤه من أنسجة ورم تم استئصالها حديثًا من مريض بالغ تم تشخيصه بورم دبقي من الدرجة الرابعة حسب تصنيف منظمة الصحة العالمية. يشير التسمية "T0" إلى أن العينة تم الحصول عليها خلال التدخل الجراحي الأولي، بينما يشير "M1" إلى النموذج المختبري المقابل المشتق من هذا الورم الأولي. تم إنشاء خط الخلايا ضمن منصة نموذج HROG (Hansestadt Rostock Glioma)، التي تركز على إنشاء مزارع ورم دبقي ذات تمريرات منخفضة للغاية تحتفظ بالخصائص الجزيئية والبيولوجية الخاصة بالمريض.

يُظهر HROG12 T0 M1 نموًا ملتصقًا في ظل ظروف الاستزراع القياسية ويظهر شكلًا يشبه الخلايا الليفية النموذجية لثقافات GBM الأولية. تُظهر الخصائص المناعية للخطوط الخلوية المشتقة من HROG التعبير عن علامات السلالة العصبية والدبقية مثل البروتين الحمضي الليفي الدبقي (GFAP) ونيستين وفيمنتين، مما يدعم أصل الورم النجمي. ضمن مجموعة HROG، يتضمن التوصيف الجزيئي تقييم المؤشرات الحيوية ذات الصلة سريريًا مثل مثيلة MGMT، وحالة تضخم EGFR، وتحليل طفرات الجينات بما في ذلك TP53 و IDH1/2 و KRAS و BRAF، مما يؤكد الحفاظ على التغيرات الجينومية المرتبطة بالورم في مزارع المراحل المبكرة.

تم استخدام HROG12 T0 M1 للتقييم المختبري للاستجابات العلاجية لعلاجات الورم الأرومي الدبقي القياسية، بما في ذلك عوامل الألكلة، بالإضافة إلى العلاجات المستهدفة التجريبية. تشير التحليلات المقارنة عبر نماذج HROG إلى استقرار الشكل، وحركية نمو قابلة للتكرار، وملامح حساسية متسقة للأدوية في المراحل المبكرة. باعتباره نموذجًا لورم أرومي دبقي منخفض التمرير مشتق من المريض، يوفر HROG12 T0 M1 منصة ذات صلة سريرية لدراسة بيولوجيا الورم، والتغاير الجزيئي، وآليات المقاومة العلاجية في الأورام الدبقية عالية الدرجة.

الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
HROG12 T0 M1 (كتالوج سايتون رقم 300882)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_B7FR

04التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

06المانح

الأصل العرقي
قوقازي