Gå til innholdet
HROG12 T0 M1
Vev
Hjerne
Sykdom
Glioblastom

Dokumenter

HROG12 T0 M1

Cell line · Produktnummer 300882

HROG12 T0 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje som er etablert fra nylig resektert svulstvev fra en voksen pasient som har fått diagnosen ...

€800.00ekskl. mva. og frakt
Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HROG12 T0 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM) cellelinje etablert fra ferskt resektert tumorvev fra en voksen pasient diagnostisert med WHO grad IV glioblastoma. Betegnelsen «T0» indikerer at prøven ble hentet ved den første kirurgiske inngrepet, mens «M1» refererer til den tilsvarende in vitro-modellen avledet fra denne primære svulsten. Cellelinjen ble generert innenfor HROG-modellplattformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserer på å etablere gliomkulturer med svært lav passasje som beholder pasientspesifikke molekylære og biologiske egenskaper.

HROG12 T0 M1 viser vedheftende vekst under standard kulturforhold og har en fibroblastlignende morfologi som er typisk for primære GBM-kulturer. Immunofenotypisk karakterisering av HROG-avledede cellelinjer viser uttrykk for nevrale og gliale markører som glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin og vimentin, noe som støtter astrocyttisk tumoropprinnelse. Innenfor HROG-samlingen inkluderer molekylær profilering vurdering av klinisk relevante biomarkører som MGMT-promotormetylering, EGFR-amplifikasjonsstatus og mutasjonsanalyse av gener, inkludert TP53, IDH1/2, KRAS og BRAF, noe som bekrefter bevaring av tumorassosierte genomiske endringer i tidlige passasjekulturer.

HROG12 T0 M1 har blitt brukt til in vitro-evaluering av terapeutiske responser på standardbehandlinger for glioblastom, inkludert alkylerende midler, samt undersøkelsesbaserte målrettede terapier. Sammenlignende analyser på tvers av HROG-modeller indikerer stabil morfologi, reproduserbar vekstkinetikk og konsistente legemiddelfølsomhetsprofiler i tidlige passasjer. Som en pasientavledet glioblastom-modell med lav passasje, gir HROG12 T0 M1 en klinisk relevant plattform for å studere tumorbiologi, molekylær heterogenitet og mekanismer for terapeutisk resistens i høygradig gliom.

Vev
Hjerne
Sykdom
Glioblastom

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HROG12 T0 M1 (Cytion-katalognummer 300882)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FR

04Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

06Donor

Etnisitet
Kaukasisk