Μετάβαση στο περιεχόμενο
HROG12 T0 M1
Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Γλοιοβλάστωμα

Έγγραφα

HROG12 T0 M1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300882

Η HROG12 T0 M1 είναι μια πρωτογενής ανθρώπινη κυτταρική σειρά πολυμορφικού γλοιοβλαστώματος (GBM), η οποία δημιουργήθηκε από πρόσφατα αφαιρεθέντα όγκο ιστό ενός ενήλικου ασθενούς στον οποίο είχε διαγνωστεί...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το HROG12 T0 M1 είναι μια πρωτογενής κυτταρική σειρά πολυμορφικού γλοιοβλαστώματος (GBM) που δημιουργήθηκε από πρόσφατα εκτομωμένο ιστό όγκου ενήλικου ασθενούς που διαγνώστηκε με γλοιοβλάστωμα βαθμού IV κατά WHO. Ο χαρακτηρισμός «T0» υποδηλώνει ότι το δείγμα ελήφθη κατά την αρχική χειρουργική επέμβαση, ενώ «M1» αναφέρεται στο αντίστοιχο in vitro μοντέλο που προέρχεται από αυτόν τον πρωτογενή όγκο. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε στο πλαίσιο της πλατφόρμας μοντέλων HROG (Hansestadt Rostock Glioma), η οποία επικεντρώνεται στη δημιουργία καλλιεργειών γλοιωμάτων εξαιρετικά χαμηλής διέλευσης που διατηρούν τα μοριακά και βιολογικά χαρακτηριστικά του συγκεκριμένου ασθενούς.

Η HROG12 T0 M1 παρουσιάζει προσκολλητική ανάπτυξη υπό τυπικές συνθήκες καλλιέργειας και εμφανίζει μορφολογία τύπου ινοβλαστών, χαρακτηριστική των πρωτογενών καλλιεργειών GBM. Ο ανοσοφαινοτυπικός χαρακτηρισμός των κυτταρικών σειρών που προέρχονται από HROG καταδεικνύει την έκφραση δεικτών νευρικής και γλοιακής καταγωγής, όπως η γλοιακή ινώδης όξινη πρωτεΐνη (GFAP), η νεστίνη και η βιμεντίνη, υποστηρίζοντας την αστροκυτταρική προέλευση του όγκου. Στην συλλογή HROG, το μοριακό προφίλ περιλαμβάνει την αξιολόγηση κλινικά σχετικών βιοδεικτών, όπως η μεθυλίωση του προαγωγού MGMT, η κατάσταση ενίσχυσης του EGFR και η ανάλυση μεταλλάξεων γονιδίων, συμπεριλαμβανομένων των TP53, IDH1/2, KRAS και BRAF, επιβεβαιώνοντας τη διατήρηση των γονιδιακών αλλοιώσεων που σχετίζονται με τον όγκο σε καλλιέργειες πρώιμων περασμάτων.

Το HROG12 T0 M1 έχει χρησιμοποιηθεί για την in vitro αξιολόγηση των θεραπευτικών αποκρίσεων σε θεραπείες γλοιοβλαστώματος που αποτελούν πρότυπο φροντίδας, συμπεριλαμβανομένων αλκυλιωτικών παραγόντων, καθώς και ερευνητικών στοχευμένων θεραπειών. Συγκριτικές αναλύσεις μεταξύ μοντέλων HROG δείχνουν σταθερή μορφολογία, αναπαραγώγιμη κινητική ανάπτυξης και συνεπή προφίλ ευαισθησίας στα φάρμακα σε πρώιμα στάδια. Ως μοντέλο γλοιοβλαστώματος χαμηλού σταδίου που προέρχεται από ασθενή, το HROG12 T0 M1 παρέχει μια κλινικά σχετική πλατφόρμα για τη μελέτη της βιολογίας του όγκου, της μοριακής ετερογένειας και των μηχανισμών θεραπευτικής αντοχής σε γλοιώματα υψηλού βαθμού.

Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Γλοιοβλάστωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HROG12 T0 M1 (αριθμός καταλόγου Cytion 300882)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_B7FR

04Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε 50% βασικό μέσο + 40% FBS + 10% DMSO ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

06Δωρητής

Εθνικότητα
Καυκάσιος