HROG12 T0 M1
Cell line · Termékszám 300882
A HROG12 T0 M1 egy primer humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy …-val diagnosztizált felnőtt beteg frissen eltávolított daganatos szövetéből állítottak elő…
Személyre szabás / Ajánlások
- HROG12 T0 M1Cell line€800.00
01Általános információk
- Leírás
A HROG12 T0 M1 egy elsődleges humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy WHO IV. fokozatú glioblastomával diagnosztizált felnőtt beteg frissen eltávolított tumoros szövetéből hoztak létre. A „T0” jelölés azt jelzi, hogy a mintát az első műtéti beavatkozás során vették, míg az „M1” jelölés az ebből az elsődleges tumorból származó megfelelő in vitro modellre utal. A sejtvonalat a HROG (Hansestadt Rostock Glioma) modellplatformon belül hozták létre, amelynek célja olyan ultra-alacsony passzálású glióma-tenyészetek létrehozása, amelyek megőrzik a betegspecifikus molekuláris és biológiai jellemzőket.
A HROG12 T0 M1 standard tenyésztési körülmények között adhezív növekedést mutat, és a primer GBM-tenyészetekre jellemző fibroblaszt-szerű morfológiát mutat. A HROG-ból származó sejtvonalak immunfenotípusos jellemzése olyan neurális és glia sejtvonal markerek expresszióját mutatja, mint a glia fibrilláris savas fehérje (GFAP), a nestin és a vimentin, ami alátámasztja az asztrocitás tumor eredetét. A HROG-gyűjteményben a molekuláris profilalkotás magában foglalja a klinikailag releváns biomarkerek, például az MGMT promóter metiláció, az EGFR amplifikációs státusz és a TP53, IDH1/2, KRAS és BRAF gének mutációs elemzésének értékelését, ami megerősíti a tumorral kapcsolatos genomikus változások megőrződését a korai passzázsú kultúrákban.
A HROG12 T0 M1-et a standard glioblastoma-kezelésekre, beleértve az alkilező szereket, valamint a kísérleti célzott terápiákat, adott terápiás válaszok in vitro értékelésére használták. A HROG modellek közötti összehasonlító elemzések stabil morfológiát, reprodukálható növekedési kinetikát és konzisztens gyógyszerérzékenységi profilokat mutatnak a korai passzázsokban. Betegektől származó, alacsony passzázsú glioblastoma modellként a HROG12 T0 M1 klinikailag releváns platformot biztosít a tumorbiológia, a molekuláris heterogenitás és a terápiás rezisztencia mechanizmusainak tanulmányozásához a magas fokú gliómákban.
- Szövet
- Agy
- Betegség
- Glioblastoma
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Azonosítók
- Hivatkozás
- HROG12 T0 M1 (Cytion katalógusszám: 300882)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FR
04Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
06Adományozó
- Etnikai hovatartozás
- Kaukázusi
07Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen
.jpg)