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HROG12 T0 M1
Tecido
Cérebro
Doença
Glioblastoma

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HROG12 T0 M1

Cell line · Número do produto 300882

A HROG12 T0 M1 é uma linha celular de glioblastoma multiforme (GBM) humano primário, estabelecida a partir de tecido tumoral recém-ressecado de um doente adulto diagnosticado com...

€800.00sem impostos nem portes de envio
Feito por encomenda
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01Informações gerais

Descrição

HROG12 T0 M1 é uma linha celular primária de glioblastoma multiforme (GBM) humano estabelecida a partir de tecido tumoral recém-ressecado de um paciente adulto diagnosticado com glioblastoma grau IV da OMS. A designação «T0» indica que a amostra foi obtida na intervenção cirúrgica inicial, enquanto «M1» se refere ao modelo in vitro correspondente derivado deste tumor primário. A linha celular foi gerada dentro da plataforma modelo HROG (Hansestadt Rostock Glioma), que se concentra no estabelecimento de culturas de glioma de passagem ultrabaixa que mantêm características moleculares e biológicas específicas do paciente.

A HROG12 T0 M1 exibe crescimento aderente em condições de cultura padrão e apresenta uma morfologia semelhante à dos fibroblastos, típica das culturas primárias de GBM. A caracterização imunofenotípica das linhas celulares derivadas da HROG demonstra a expressão de marcadores da linhagem neural e glial, tais como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP), a nestina e a vimentina, apoiando a origem astrocítica do tumor. Na coleção HROG, o perfil molecular inclui a avaliação de biomarcadores clinicamente relevantes, como metilação do promotor MGMT, estado de amplificação do EGFR e análise mutacional de genes, incluindo TP53, IDH1/2, KRAS e BRAF, confirmando a preservação das alterações genómicas associadas ao tumor em culturas de passagem precoce.

O HROG12 T0 M1 tem sido utilizado para avaliação in vitro de respostas terapêuticas a tratamentos padrão para glioblastoma, incluindo agentes alquilantes, bem como terapias direcionadas em fase de investigação. Análises comparativas entre modelos HROG indicam morfologia estável, cinética de crescimento reprodutível e perfis de sensibilidade a medicamentos consistentes em passagens iniciais. Como um modelo de glioblastoma derivado de paciente e de baixa passagem, o HROG12 T0 M1 fornece uma plataforma clinicamente relevante para o estudo da biologia tumoral, heterogeneidade molecular e mecanismos de resistência terapêutica em gliomas de alto grau.

Tecido
Cérebro
Doença
Glioblastoma

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Identificadores

Referência
HROG12 T0 M1 (número de catálogo Cytion 300882)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FR

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Etnia
Caucasiano