HROG12 T0 M1
Cell line · Preces numurs 300882
HROG12 T0 M1 ir primārā cilvēka daudzveidīgās glioblastomas (GBM) šūnu līnija, kas izveidota no svaigi izgriezta audzēja audiem pieaugušam pacientam, kuram diagnosticēta ...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HROG12 T0 M1Cell line€800.00
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HROG12 T0 M1 ir primārā cilvēka glioblastoma multiforme (GBM) šūnu līnija, kas izveidota no svaigi izgriezta audzēja audiem pieaugušam pacientam, kuram diagnosticēta IV pakāpes glioblastoma saskaņā ar PVO klasifikāciju. Apzīmējums „T0” norāda, ka paraugs tika iegūts sākotnējā ķirurģiskā iejaukšanās laikā, savukārt „M1” attiecas uz atbilstošo in vitro modeli, kas iegūts no šī primārā audzēja. Šūnu līnija tika izveidota HROG (Hansestadt Rostock Glioma) modeļu platformā, kas koncentrējas uz ultra-zemas pasāžas gliomas kultūru izveidi, kas saglabā pacientam specifiskas molekulārās un bioloģiskās īpašības.
HROG12 T0 M1 parāda adhezīvu augšanu standarta kultivēšanas apstākļos un uzrāda fibroblastu tipisku morfoloģiju, kas ir raksturīga primārajām GBM kultūrām. HROG atvasināto šūnu līniju imunofenotipiskā raksturojuma analīze liecina par neironu un glijas šūnu līnijas marķieru, piemēram, glijas fibrilārā skābā proteīna (GFAP), nestīna un vimentīna, ekspresiju, kas apstiprina astrocitāro audzēja izcelsmi. HROG kolekcijā molekulārā profilēšana ietver klīniski nozīmīgu biomarķieru novērtēšanu, piemēram, MGMT promotora metilāciju, EGFR amplifikācijas statusu un gēnu mutāciju analīzi, tostarp TP53, IDH1/2, KRAS un BRAF, apstiprinot audzējiem saistītu genomisko izmaiņu saglabāšanos agrīnās pasāžas kultūrās.
HROG12 T0 M1 ir izmantots in vitro novērtējumam par terapeitisko reakciju uz standarta glioblastomas ārstēšanu, tostarp alkilējošiem līdzekļiem, kā arī izpētei paredzētām mērķtiecīgām terapijām. Salīdzinošās analīzes starp HROG modeļiem liecina par stabilu morfoloģiju, reproducējamu augšanas kinētiku un konsekventiem zāļu jutības profiliem agrīnās pasāžās. Kā no pacientiem iegūts, zemas pasāžas glioblastomas modelis, HROG12 T0 M1 nodrošina klīniski nozīmīgu platformu augstas pakāpes gliomas audzēja bioloģijas, molekulārās heterogenitātes un terapeitiskās rezistences mehānismu pētīšanai.
- Audums
- Smadzenes
- Slimība
- Glioblastoma
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Identifikatori
- Atsauce
- HROG12 T0 M1 (Cytion kataloga numurs 300882)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FR
04Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
06Ziedotājs
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
07Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Tiek piemēroti līgumi ar trešajām personām
- Jā
.jpg)