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A7r5
Tissu
Aorte thoracique, muscle lisse
Synonymes
A7R5

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A7r5

Cell line · Référence du produit 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Dérivée du muscle lisse de l'aorte thoracique embryonnaire d'un rat BDIx, la lignée cellulaire A7r5 est largement utilisée dans la recherche cardiovasculaire. Ces cellules semblables à des fibroblastes présentent une morphologie unique en forme de ruban plat qui se transforme en réseaux parallèles de cellules fusiformes au fur et à mesure qu'elles se différencient. Cette adaptation structurelle distincte facilite l'étude de la dynamique et de la morphologie cellulaires dans diverses conditions physiologiques. Pendant la phase stationnaire de leur cycle de croissance, les cellules A7r5 présentent une augmentation significative des activités de la myokinase et de la créatine phosphokinase (CPK), enzymes essentielles au transfert d'énergie et au métabolisme cellulaires.

La synthèse d'une isoenzyme CPK de type musculaire spécifique à l'arrêt de la division cellulaire dans les cellules A7r5 constitue un modèle précieux pour l'étude des mécanismes moléculaires qui sous-tendent le développement et la différenciation musculaires. Cette lignée cellulaire a permis d'explorer les effets de l'angiotensine II sur le stress oxydatif vasculaire, ce qui permet de comprendre comment cette hormone influence la physiologie cardiovasculaire. En outre, les cellules A7r5 ont été utilisées pour étudier les effets inhibiteurs de la phospholipase A2 (PLA2) sur la formation de gouttelettes lipidiques, ce qui souligne encore leur utilité dans la recherche cardiovasculaire. Ces applications soulignent la polyvalence de la lignée cellulaire A7r5 et son rôle essentiel dans l'élucidation des voies critiques et des cibles thérapeutiques potentielles dans les études sur les maladies cardiovasculaires.

Tissu
Aorte thoracique, muscle lisse
Synonymes
  • A7R5

02Classification

Organisme
Rat
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Fibroblaste

04Identifiants

Référence
A7r5 (numéro de catalogue Cytion 305198)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Myokinase, Créatine Phosphokinase (Isoenzyme musculaire), Myosine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
BDIx
Âge du donneur
Embryon