Mine otse sisu juurde
A7r5
Kude
Aortat, rindkere, silelihas
Sünonüümid
A7R5

Dokumendid

A7r5

Cell line · Toote number 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BDIx-rottide embrüonaalse rinna-aordi silelihasest saadud A7r5 rakuliini kasutatakse laialdaselt kardiovaskulaarsetes uuringutes. Neil fibroblastilaadsetel rakkudel on ainulaadne lame lintjas morfoloogia, mis diferentseerumisel muutub paralleelseteks spindlikujulisteks rakkude massiivideks. See eriline struktuuriline kohanemine hõlbustab rakkude dünaamika ja morfoloogia uurimist erinevates füsioloogilistes tingimustes. Kasvutsükli statsionaarses faasis on A7r5 rakkudel märgatavalt suurenenud müokinaasi ja kreatiinfosfokinaasi (CPK) aktiivsus; need ensüümid on olulised raku energia ülekandmisel ja ainevahetuses.

Spetsiifilise lihastüübi CPK isoensüümi süntees rakkude A7r5 jagunemise lõpetamisel annab väärtusliku mudeli lihaste arengu ja diferentseerumise aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. See rakuliin on aidanud uurida angiotensiin II mõju vaskulaarsele oksüdatiivsele stressile, andes ülevaate sellest, kuidas see hormoon mõjutab kardiovaskulaarset füsioloogiat. Lisaks on A7r5 rakke kasutatud fosfolipaas A2 (PLA2) inhibeeriva mõju uurimiseks lipiidipisarate moodustumisele, mis rõhutab veelgi nende kasulikkust kardiovaskulaarsetes uuringutes. Need rakendused rõhutavad A7r5 rakuliini mitmekülgsust ja selle keskset rolli kriitiliste radade ja potentsiaalsete terapeutiliste sihtmärkide selgitamisel kardiovaskulaarsete haiguste uuringutes.

Kude
Aortat, rindkere, silelihas
Sünonüümid
  • A7R5

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
A7r5 (Cytioni katalooginumber 305198)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Müokinaas, kreatiinfosfokinaas (lihaste isoensüüm), müosiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BDIx
Doonori vanus
Embrüo