Ga naar de inhoud
A7r5
Weefsel
Aorta, borstkas, gladde spier
Synoniemen
A7R5

Documenten

A7r5

Cell line · Productnummer 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De A7r5 cellijn is afgeleid van de gladde spier van de embryonale thoracale aorta van een BDIx rat en wordt veel gebruikt in cardiovasculair onderzoek. Deze fibroblast-achtige cellen vertonen een unieke platte lintachtige morfologie die tijdens de differentiatie overgaat in parallelle arrays van spoelvormige cellen. Deze duidelijke structurele aanpassing vergemakkelijkt de studie van celdynamica en morfologie onder verschillende fysiologische omstandigheden. Tijdens de stationaire fase van hun groeicyclus vertonen A7r5 cellen een significante toename in de activiteiten van myokinase en creatinefosfokinase (CPK), enzymen die cruciaal zijn in cellulaire energieoverdracht en metabolisme.

De synthese van een specifiek spiertype CPK-isoenzym na het stoppen van de celdeling in A7r5 cellen biedt een waardevol model voor het onderzoeken van moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan spierontwikkeling en -differentiatie. Deze cellijn heeft een belangrijke rol gespeeld bij het onderzoeken van de effecten van angiotensine II op vasculaire oxidatieve stress en biedt inzicht in hoe dit hormoon de cardiovasculaire fysiologie beïnvloedt. Bovendien zijn A7r5-cellen gebruikt om de remmende effecten van fosfolipase A2 (PLA2) op de vorming van lipidedruppels te bestuderen, wat hun nut voor cardiovasculair onderzoek verder benadrukt. Deze toepassingen onderstrepen de veelzijdigheid van de A7r5 cellijn en zijn centrale rol in het ophelderen van kritieke pathways en potentiële therapeutische targets in onderzoeken naar hart- en vaatziekten.

Weefsel
Aorta, borstkas, gladde spier
Synoniemen
  • A7R5

02Classificatie

Organisme
Rat
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
A7r5 (Cytion catalogusnummer 305198)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Myokinase, Creatinefosfokinase (spier-isoenzym), Myosine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BDIx
Leeftijd van de donor
Embryo