Pāriet uz saturu
A7r5
Audums
Aorta, krūšu kurvja, gludā muskulatūra
Sinonīmi
A7R5

Dokumenti

A7r5

Cell line · Preces numurs 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

A7r5 šūnu līnija, kas iegūta no BDIx žurku embrionālās krūšu aortas gludās muskulatūras, tiek plaši izmantota kardiovaskulāros pētījumos. Šīm fibroblastiem līdzīgajām šūnām ir unikāla plakana lentveida morfoloģija, kas diferenciācijas gaitā pāriet paralēlos vārpstas formas šūnu masīvos. Šī atšķirīgā strukturālā pielāgošanās atvieglo šūnu dinamikas un morfoloģijas izpēti dažādos fizioloģiskos apstākļos. Augšanas cikla stacionārās fāzes laikā A7r5 šūnās ievērojami palielinās miokināzes un kreatīnfosfokināzes (CPK) aktivitāte - enzīmu, kas ir būtiski svarīgi šūnu enerģijas pārnesē un vielmaiņā.

Īpaša muskuļu tipa CPK izoenzīma sintēze pēc šūnu dalīšanās pārtraukšanas A7r5 šūnās ir vērtīgs modelis, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir muskuļu attīstības un diferenciācijas pamatā. Šī šūnu līnija ir bijusi noderīga, pētot angiotensīna II ietekmi uz asinsvadu oksidatīvo stresu, sniedzot ieskatu, kā šis hormons ietekmē kardiovaskulāro fizioloģiju. Turklāt A7r5 šūnas ir izmantotas, lai pētītu fosfolipāzes A2 (PLA2) inhibējošo ietekmi uz lipīdu pilienu veidošanos, tādējādi vēl vairāk uzsverot to lietderību kardiovaskulāros pētījumos. Šie pielietojumi uzsver A7r5 šūnu līnijas daudzpusību un tās izšķirošo lomu svarīgāko ceļu un potenciālo terapeitisko mērķu noskaidrošanā kardiovaskulāro slimību pētījumos.

Audums
Aorta, krūšu kurvja, gludā muskulatūra
Sinonīmi
  • A7R5

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
A7r5 (Cytion kataloga numurs 305198)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Miokināze, kreatīnfosfokināze (muskuļu izoenzīms), miozīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BDIx
Donora vecums
Embrijs