Prejsť na obsah
A7r5
Tkanivo
Aorta, hrudná, hladké svalstvo
Synonymá
A7R5

Dokumenty

A7r5

Cell line · Číslo výrobku 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia A7r5, odvodená z hladkej svaloviny embryonálnej hrudnej aorty potkana BDIx, sa vo veľkej miere používa v kardiovaskulárnom výskume. Tieto fibroblastom podobné bunky vykazujú jedinečnú plochú pásovú morfológiu, ktorá pri diferenciácii prechádza do paralelných polí buniek vretenovitého tvaru. Táto výrazná štrukturálna adaptácia uľahčuje štúdium bunkovej dynamiky a morfológie za rôznych fyziologických podmienok. Počas stacionárnej fázy svojho rastového cyklu vykazujú bunky A7r5 výrazné zvýšenie aktivity myokinázy a kreatínfosfokinázy (CPK), enzýmov, ktoré sú rozhodujúce pre prenos energie a metabolizmus buniek.

Syntéza špecifického svalového typu izoenzýmu CPK po zastavení bunkového delenia v bunkách A7r5 poskytuje cenný model na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom vývoja a diferenciácie svalov. Táto bunková línia bola nápomocná pri skúmaní účinkov angiotenzínu II na oxidačný stres v cievach, čo ponúka pohľad na to, ako tento hormón ovplyvňuje kardiovaskulárnu fyziológiu. Okrem toho sa bunky A7r5 použili na štúdium inhibičných účinkov fosfolipázy A2 (PLA2) na tvorbu lipidových kvapiek, čo ďalej zdôrazňuje ich užitočnosť v kardiovaskulárnom výskume. Tieto aplikácie zdôrazňujú všestrannosť bunkovej línie A7r5 a jej kľúčovú úlohu pri objasňovaní kritických ciest a potenciálnych terapeutických cieľov v štúdiách kardiovaskulárnych ochorení.

Tkanivo
Aorta, hrudná, hladké svalstvo
Synonymá
  • A7R5

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
A7r5 (katalógové číslo Cytion 305198)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Myokináza, kreatínfosfokináza (svalový izoenzým), myozín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
BDIx
Vek darcu
Embryo