Přejít na obsah
A7r5
Tkáň
Aorta, hrudní, hladká svalovina
Synonyma
A7R5

Dokumenty

A7r5

Cell line · Číslo výrobku 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie A7r5, odvozená z hladké svaloviny embryonální hrudní aorty potkana BDIx, se hojně využívá v kardiovaskulárním výzkumu. Tyto fibroblastům podobné buňky vykazují jedinečnou plochou páskovou morfologii, která při diferenciaci přechází v paralelní pole vřetenovitých buněk. Tato výrazná strukturální adaptace usnadňuje studium buněčné dynamiky a morfologie za různých fyziologických podmínek. Během stacionární fáze svého růstového cyklu vykazují buňky A7r5 výrazné zvýšení aktivity myokinázy a kreatinfosfokinázy (CPK), enzymů, které mají zásadní význam pro přenos buněčné energie a metabolismus.

Syntéza specifického svalového typu izoenzymu CPK po ukončení buněčného dělení v buňkách A7r5 poskytuje cenný model pro zkoumání molekulárních mechanismů, které jsou základem vývoje a diferenciace svalů. Tato buněčná linie sehrála důležitou roli při zkoumání účinků angiotenzinu II na cévní oxidační stres, což nabízí pohled na to, jak tento hormon ovlivňuje kardiovaskulární fyziologii. Kromě toho byly buňky A7r5 použity ke studiu inhibičních účinků fosfolipázy A2 (PLA2) na tvorbu lipidových kapének, což dále zdůrazňuje jejich užitečnost v kardiovaskulárním výzkumu. Tyto aplikace podtrhují všestrannost buněčné linie A7r5 a její klíčovou roli při objasňování kritických cest a potenciálních terapeutických cílů ve studiích kardiovaskulárních onemocnění.

Tkáň
Aorta, hrudní, hladká svalovina
Synonyma
  • A7R5

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
A7r5 (katalogové číslo Cytion 305198)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Myokináza, kreatinfosfokináza (svalový izoenzym), myosin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BDIx
Věk dárce
Embrya