Gå til innholdet
A7r5
Vev
Aorta, thorakal, glatt muskulatur
Synonymer
A7R5

Dokumenter

A7r5

Cell line · Produktnummer 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

A7r5-cellelinjen stammer fra glatt muskulatur i den embryonale torakale aorta hos en BDIx-rotte, og brukes i stor utstrekning i kardiovaskulær forskning. Disse fibroblastlignende cellene har en unik flat, båndlignende morfologi som går over i parallelle matriser av spindelformede celler etter hvert som de differensieres. Denne distinkte strukturelle tilpasningen gjør det lettere å studere celledynamikk og morfologi under ulike fysiologiske forhold. I den stasjonære fasen av vekstsyklusen viser A7r5-celler en betydelig økning i aktiviteten til myokinase og kreatinfosfokinase (CPK), enzymer som er avgjørende for energioverføring og metabolisme i cellene.

Syntesen av et CPK-isoenzym av en spesifikk muskeltype når celledelingen i A7r5-celler opphører, gir en verdifull modell for å undersøke molekylære mekanismer som ligger til grunn for muskelutvikling og differensiering. Denne cellelinjen har vært viktig i utforskningen av effekten av angiotensin II på vaskulært oksidativt stress, noe som gir innsikt i hvordan dette hormonet påvirker kardiovaskulær fysiologi. I tillegg har A7r5-celler blitt brukt til å studere de hemmende effektene av fosfolipase A2 (PLA2) på dannelsen av lipiddråper, noe som ytterligere understreker cellelinjens anvendelighet i kardiovaskulær forskning. Disse bruksområdene understreker A7r5-cellelinjens allsidighet og dens sentrale rolle i å belyse kritiske signalveier og potensielle terapeutiske mål i studier av hjerte- og karsykdommer.

Vev
Aorta, thorakal, glatt muskulatur
Synonymer
  • A7R5

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A7r5 (Cytion-katalognummer 305198)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Myokinase, kreatinfosfokinase (muskelisoenzym), myosin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
BDIx
Donorens alder
Embryo