Preskoči na vsebino
A7r5
Tkivo
Aorta, prsna, gladke mišice
Sinonimi
A7R5

Dokumenti

A7r5

Cell line · Številka izdelka 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija A7r5, ki izhaja iz gladke mišice embrionalne prsne aorte podgane BDIx, se pogosto uporablja pri raziskavah srca in ožilja. Te fibroblastom podobne celice imajo edinstveno morfologijo v obliki ravnega traku, ki med diferenciacijo prehaja v vzporedne sklope celic v obliki vretena. Ta posebna strukturna prilagoditev omogoča lažje preučevanje celične dinamike in morfologije v različnih fizioloških pogojih. Med stacionarno fazo rastnega cikla se pri celicah A7r5 znatno poveča aktivnost miokinaze in kreatinfosfokinaze (CPK), encimov, ki sta ključna za prenos energije in presnovo v celicah.

Sinteza izoencima CPK specifičnega mišičnega tipa ob prenehanju celične delitve v celicah A7r5 je dragocen model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, na katerih temeljita razvoj in diferenciacija mišic. Ta celična linija je bila ključna pri raziskovanju učinkov angiotenzina II na oksidativni stres v ožilju, kar omogoča vpogled v to, kako ta hormon vpliva na kardiovaskularno fiziologijo. Poleg tega so bile celice A7r5 uporabljene za preučevanje zaviralnih učinkov fosfolipaze A2 (PLA2) na tvorbo lipidnih kapljic, kar še dodatno poudarja njihovo uporabnost pri raziskavah srca in ožilja. Te aplikacije poudarjajo vsestranskost celične linije A7r5 in njeno ključno vlogo pri pojasnjevanju kritičnih poti in potencialnih terapevtskih ciljev v študijah srčno-žilnih bolezni.

Tkivo
Aorta, prsna, gladke mišice
Sinonimi
  • A7R5

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
A7r5 (kataloška številka Cytion 305198)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Miokinaza, kreatinfosfokinaza (mišični izoencim), miozin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
BDIx
Starost darovalca
Zarodek