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A7r5
Tecido
Aorta torácica, músculo liso
Sinónimos
A7R5

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A7r5

Cell line · Número do produto 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

Derivada do músculo liso da aorta torácica embrionária de um rato BDIx, a linha celular A7r5 é amplamente utilizada na investigação cardiovascular. Estas células semelhantes a fibroblastos apresentam uma morfologia única semelhante a uma fita plana que transita para matrizes paralelas de células fusiformes à medida que se diferenciam. Esta adaptação estrutural distinta facilita o estudo da dinâmica e morfologia celular em várias condições fisiológicas. Durante a fase estacionária do seu ciclo de crescimento, as células A7r5 exibem um aumento significativo das actividades da mioquinase e da creatina fosfoquinase (CPK), enzimas críticas na transferência de energia celular e no metabolismo.

A síntese de uma isoenzima CPK específica do tipo muscular após a cessação da divisão celular nas células A7r5 constitui um modelo valioso para a investigação dos mecanismos moleculares subjacentes ao desenvolvimento e diferenciação muscular. Esta linha celular tem sido fundamental para explorar os efeitos da angiotensina II no stress oxidativo vascular, oferecendo uma perspetiva sobre a forma como esta hormona influencia a fisiologia cardiovascular. Além disso, as células A7r5 têm sido utilizadas para estudar os efeitos inibitórios da fosfolipase A2 (PLA2) na formação de gotículas lipídicas, realçando ainda mais a sua utilidade na investigação cardiovascular. Estas aplicações sublinham a versatilidade da linha celular A7r5 e o seu papel fundamental na elucidação de vias críticas e potenciais alvos terapêuticos em estudos de doenças cardiovasculares.

Tecido
Aorta torácica, músculo liso
Sinónimos
  • A7R5

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Fibroblastos

04Identificadores

Referência
A7r5 (número de catálogo da Cytion 305198)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Mioquinase, Creatina Fosfoquinase (isoenzima muscular), Miosina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
BDIx
Idade do dador
Embrião