A7r5
Cell line · Product number 305198
Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...
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01General information
- Description
Issue du muscle lisse de l’aorte thoracique embryonnaire d’un rat BDIx, la lignée cellulaire A7r5 est largement utilisée dans la recherche cardiovasculaire. Ces cellules de type fibroblastes présentent une morphologie unique, aplatie et en forme de ruban, qui évolue vers des rangées parallèles de cellules fusiformes à mesure qu’elles se différencient. Cette adaptation structurelle particulière facilite l’étude de la dynamique et de la morphologie cellulaires dans diverses conditions physiologiques. Au cours de la phase stationnaire de leur cycle de croissance, les cellules A7r5 présentent une augmentation significative de l’activité de la myokinase et de la créatine phosphokinase (CPK), des enzymes essentielles au transfert d’énergie et au métabolisme cellulaires.
La synthèse d’une isoenzyme spécifique de la CPK de type musculaire, qui survient à l’arrêt de la division cellulaire chez les cellules A7r5, constitue un modèle précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents au développement et à la différenciation musculaires. Cette lignée cellulaire a joué un rôle déterminant dans l’exploration des effets de l’angiotensine II sur le stress oxydatif vasculaire, offrant ainsi un aperçu de la manière dont cette hormone influence la physiologie cardiovasculaire. De plus, les cellules A7r5 ont été utilisées pour étudier les effets inhibiteurs de la phospholipase A2 (PLA2) sur la formation de gouttelettes lipidiques, ce qui souligne encore davantage leur utilité dans la recherche cardiovasculaire. Ces applications soulignent la polyvalence de la lignée cellulaire A7r5 et son rôle central dans l’élucidation des voies critiques et des cibles thérapeutiques potentielles dans les études sur les maladies cardiovasculaires.
- Tissue
- Aorte thoracique, muscle lisse
- Synonyms
- A7R5
02Classification
- Organism
- Rat
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Fibroblaste
04Identifiers
- Citation
- A7r5 (numéro de catalogue Cytion 305198)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0137
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Myokinase, créatine phosphokinase (isoenzyme musculaire), myosine
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Breed / subspecies
- BDIx
- Donor age
- Embryon
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
