Tartalomra ugrás
A7r5
Szövet
Aorta, mellkasi, simaizomzatú
Szinonimák
A7R5

Dokumentumok

A7r5

Cell line · Termékszám 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BDIx patkány embrionális mellkasi aorta simaizomzatából származó A7r5 sejtvonalat széles körben alkalmazzák a szív- és érrendszeri kutatásokban. Ezek a fibroblaszt-szerű sejtek egyedi, lapos, szalagszerű morfológiát mutatnak, amely differenciálódásuk során párhuzamos, orsó alakú sejtekké alakul át. Ez az eltérő szerkezeti adaptáció megkönnyíti a sejtdinamika és a morfológia tanulmányozását különböző fiziológiai körülmények között. Növekedési ciklusuk stacionárius fázisában az A7r5 sejtek a sejtek energiaátvitelében és anyagcseréjében kritikus szerepet játszó enzimek, a miokináz és a kreatin-foszfokináz (CPK) aktivitásának jelentős növekedését mutatják.

Az A7r5 sejtekben a sejtosztódás megszűnésekor egy specifikus izomtípusú CPK izoenzim szintézise értékes modellt biztosít az izomfejlődés és differenciálódás hátterében álló molekuláris mechanizmusok vizsgálatához. Ez a sejtvonal fontos szerepet játszott az angiotenzin II érrendszeri oxidatív stresszre gyakorolt hatásának feltárásában, betekintést nyújtva abba, hogy ez a hormon hogyan befolyásolja a kardiovaszkuláris fiziológiát. Az A7r5 sejteket emellett a foszfolipáz A2 (PLA2) lipidcseppképződésre gyakorolt gátló hatásának tanulmányozására is használták, ami még inkább kiemeli hasznosságukat a kardiovaszkuláris kutatásban. Ezek az alkalmazások aláhúzzák az A7r5 sejtvonal sokoldalúságát és kulcsfontosságú szerepét a szív- és érrendszeri betegségek vizsgálatában a kritikus útvonalak és a potenciális terápiás célpontok feltárásában.

Szövet
Aorta, mellkasi, simaizomzatú
Szinonimák
  • A7R5

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblasztok

04Azonosítók

Hivatkozás
A7r5 (Cytion katalógusszám: 305198)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Myokináz, kreatin-foszfokináz (izom-izoenzim), miozin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
BDIx
Az adományozó életkora
Embrió