Siirry sisältöön
A7r5
Kudos
Aortta, rintakehä, sileä lihaskudos
Synonyymit
A7R5

Asiakirjat

A7r5

Cell line · Tuotenumero 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

BDIx-rotan alkion rinta-aortan sileästä lihaksesta peräisin olevaa A7r5-solulinjaa käytetään laajalti sydän- ja verisuonitutkimuksessa. Näillä fibroblastin kaltaisilla soluilla on ainutlaatuinen litteä nauhamainen morfologia, joka muuttuu erilaistuessaan yhdensuuntaisiksi karanmuotoisiksi soluryhmiksi. Tämä erilainen rakenteellinen mukautuminen helpottaa soludynamiikan ja morfologian tutkimista erilaisissa fysiologisissa olosuhteissa. Kasvusyklinsä stationaarisessa vaiheessa A7r5-solut osoittavat merkittävää kasvua myokinaasin ja kreatiinifosfokinaasin (CPK) aktiivisuudessa, jotka ovat kriittisiä entsyymejä solujen energiansiirrossa ja aineenvaihdunnassa.

Erityisen lihastyypin CPK-isoentsyymin synteesi A7r5-solujen solunjakautumisen loppuessa tarjoaa arvokkaan mallin lihaksen kehityksen ja erilaistumisen taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen. Tämä solulinja on ollut keskeinen tekijä tutkittaessa angiotensiini II:n vaikutuksia verisuonten oksidatiiviseen stressiin, mikä tarjoaa tietoa siitä, miten tämä hormoni vaikuttaa sydän- ja verisuonifysiologiaan. Lisäksi A7r5-soluja on käytetty tutkimaan fosfolipaasi A2:n (PLA2) estäviä vaikutuksia lipidipisaroiden muodostumiseen, mikä korostaa entisestään niiden hyödyllisyyttä sydän- ja verisuonitutkimuksessa. Nämä sovellukset korostavat A7r5-solulinjan monipuolisuutta ja sen keskeistä roolia kriittisten reittien ja mahdollisten terapeuttisten kohteiden selvittämisessä sydän- ja verisuonitautitutkimuksissa.

Kudos
Aortta, rintakehä, sileä lihaskudos
Synonyymit
  • A7R5

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
A7r5 (Cytionin tuotenumero 305198)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Myokinaasi, kreatiinifosfokinaasi (lihaksen isoentsyymi), myosiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BDIx
Luovuttajan ikä
Alkio