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A7r5
Pañuelo de papel
Aorta torácica, músculo liso
Sinónimos
A7R5

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A7r5

Cell line · Número de producto 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

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01Información general

Descripción

Derivada del músculo liso de la aorta torácica embrionaria de una rata BDIx, la línea celular A7r5 se emplea ampliamente en la investigación cardiovascular. Estas células similares a fibroblastos presentan una morfología única en forma de cinta plana que se transforma en matrices paralelas de células fusiformes a medida que se diferencian. Esta peculiar adaptación estructural facilita el estudio de la dinámica y la morfología celulares en diversas condiciones fisiológicas. Durante la fase estacionaria de su ciclo de crecimiento, las células A7r5 muestran un aumento significativo de las actividades de la mioquinasa y la creatina fosfocinasa (CPK), enzimas fundamentales en la transferencia de energía y el metabolismo celulares.

La síntesis de una isoenzima CPK específica del tipo muscular tras el cese de la división celular en las células A7r5 proporciona un modelo valioso para investigar los mecanismos moleculares que subyacen al desarrollo y la diferenciación muscular. Esta línea celular ha sido decisiva para explorar los efectos de la angiotensina II sobre el estrés oxidativo vascular, lo que permite comprender cómo influye esta hormona en la fisiología cardiovascular. Además, las células A7r5 se han utilizado para estudiar los efectos inhibidores de la fosfolipasa A2 (PLA2) sobre la formación de gotas lipídicas, lo que pone aún más de relieve su utilidad en la investigación cardiovascular. Estas aplicaciones subrayan la versatilidad de la línea celular A7r5 y su papel fundamental en la elucidación de vías críticas y posibles dianas terapéuticas en estudios sobre enfermedades cardiovasculares.

Pañuelo de papel
Aorta torácica, músculo liso
Sinónimos
  • A7R5

02Clasificación

Organismo
Rata
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Fibroblastos

04Identificadores

Referencia
A7r5 (número de catálogo 305198 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Mioquinasa, creatina fosfoquinasa (isoenzima muscular), miosina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
BDIx
Edad del donante
Embrión