İçeriğe atla
A7r5
Doku
Aort, torasik, düz kas
Eş anlamlılar
A7R5

A7r5

Cell line · Ürün numarası 305198

Derived from the smooth muscle of the embryonic thoracic aorta in a BDIx rat, the A7r5 cell line is extensively employed in cardiovascular research. These...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

BDIx sıçanın embriyonik torasik aortunun düz kasından türetilen A7r5 hücre hattı, kardiyovasküler araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu fibroblast benzeri hücreler, farklılaştıkça iğ şeklindeki hücrelerin paralel dizilerine dönüşen benzersiz bir düz şerit benzeri morfoloji sergiler. Bu farklı yapısal adaptasyon, çeşitli fizyolojik koşullar altında hücresel dinamiklerin ve morfolojinin incelenmesini kolaylaştırır. Büyüme döngülerinin durağan fazı sırasında A7r5 hücreleri, hücresel enerji transferi ve metabolizmasında kritik öneme sahip enzimler olan miyokinaz ve kreatin fosfokinaz (CPK) aktivitelerinde önemli bir artış sergiler.

A7r5 hücrelerinde hücre bölünmesinin durması üzerine spesifik bir kas tipi CPK izoenziminin sentezi, kas gelişimi ve farklılaşmasının altında yatan moleküler mekanizmaların araştırılması için değerli bir model sağlar. Bu hücre hattı, anjiyotensin II'nin vasküler oksidatif stres üzerindeki etkilerini araştırmada etkili olmuş ve bu hormonun kardiyovasküler fizyolojiyi nasıl etkilediğine dair içgörüler sunmuştur. Ayrıca, A7r5 hücreleri fosfolipaz A2'nin (PLA2) lipid damlacık oluşumu üzerindeki inhibitör etkilerini incelemek için kullanılmış ve kardiyovasküler araştırmalardaki faydalarını daha da vurgulamıştır. Bu uygulamalar, A7r5 hücre hattının çok yönlülüğünün ve kardiyovasküler hastalık çalışmalarında kritik yolların ve potansiyel terapötik hedeflerin aydınlatılmasındaki önemli rolünün altını çizmektedir.

Doku
Aort, torasik, düz kas
Eş anlamlılar
  • A7R5

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A7r5 (Cytion katalog numarası 305198)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_0137

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Miyokinaz, Kreatin Fosfokinaz (Kas İzoenzimi), Miyozin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BDIx
Bağışçının yaşı
Embriyo