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ARPE-19
Tissu
Œil, épithélium pigmenté rétinien, rétine
Synonymes
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

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ARPE-19

Cell line · Référence du produit 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire ARPE-19, dérivée de l'épithélium pigmentaire rétinien (EPR) d'un homme de 19 ans, présente des caractéristiques fonctionnelles proches des cellules EPR natives, ce qui en fait un modèle cellulaire épithélial essentiel dans la recherche ophtalmologique. Ces cellules sont utilisées dans les études liées à la rétine des vertébrés et à la physiologie de l'épithélium pigmentaire rétinien. Lorsqu'elles sont cultivées dans des systèmes de culture cellulaire en 3D ou en monocouche sur des filtres recouverts de laminine avec un milieu à faible teneur en sérum, les cellules ARPE-19 se polarisent morphologiquement et forment des jonctions serrées, présentant une résistance transépithéliale semblable à celle observée in vivo.

Les cellules ARPE-19, qui expriment des marqueurs spécifiques de l'EPR tels que CRALBP et RPE-65, constituent un excellent modèle pour comprendre les processus de pigmentation de l'épithélium pigmentaire rétinien, y compris la synthèse de la mélanine et le contenu des mélanosomes.

L'application des cellules humaines ARPE-19 s'étend aux études de pharmacocinétique et de perméabilité oculaires, ce qui permet de mieux comprendre l'efficacité des chimiothérapies oculaires et les considérations relatives aux barrières rétiniennes. Leur utilisation pour examiner les interactions entre la pharmacocinétique et la teneur en mélanine fournit des données précieuses sur la liaison et l'absorption des médicaments. Les cellules RPE-19 contribuent à notre compréhension des explants rétiniens et du rôle de l'épithélium dans le développement de l'œil, étant donné leur expression de réseaux impliqués dans la formation précoce de l'œil et la contraction musculaire.

En résumé, la lignée cellulaire ARPE-19 est un modèle essentiel pour la recherche ophtalmologique, car elle permet de mieux comprendre la physiologie de la rétine, les processus de pigmentation et l'efficacité des traitements oculaires.

Tissu
Œil, épithélium pigmenté rétinien, rétine
Synonymes
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Oui

04Identifiants

Référence
ARPE-19 (Cytion, numéro de catalogue 305025)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Marqueurs spécifiques de Rpe Cralbp et Rpe-65
Expression des antigènes
Marqueurs spécifiques de l'EPR CRALBP et RPE-65

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
19 ans