İçeriğe atla
ARPE-19
Doku
Göz, retina pigmentli epiteli, retina
Eş anlamlılar
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

ARPE-19

Cell line · Ürün numarası 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

19 yaşındaki bir erkeğin retina pigment epitelinden (RPE) türetilen ARPE-19 hücre hattı, doğal RPE hücrelerine benzer işlevsel özelliklere sahiptir ve bu da onu oftalmik araştırmalarda çok önemli bir epitel hücre modeli haline getirmektedir. Bu hücreler omurgalı retinası ve retina pigment epiteli fizyolojisi ile ilgili çalışmalarda kullanılmaktadır. ARPE-19 hücreleri, 3D hücre kültürü sistemlerinde veya düşük serumlu ortam ile laminin kaplı filtreler üzerinde hücre tek tabakası olarak kültürlendiğinde, morfolojik polarizasyona ulaşır ve sıkı bağlantılar oluşturarak in vivo olarak gözlemlenene benzer transepitelyal direnç sergiler.

CRALBP ve RPE-65 gibi RPE'ye özgü belirteçleri ifade eden ARPE-19 hücreleri, melanin sentezi ve melanozom içeriği de dahil olmak üzere retina pigment epitelinin pigmentasyon süreçlerini anlamak için mükemmel bir model olarak hizmet eder.

ARPE-19 insan hücrelerinin uygulanması, oküler farmakokinetik ve geçirgenlik çalışmalarına kadar uzanarak oküler kemoterapi etkinliği ve retinal bariyerlerle ilgili hususlar hakkında içgörü sağlar. Farmakokinetik ve melanin içeriği arasındaki etkileşimleri incelemede kullanımları, ilaç bağlanması ve alımı hakkında değerli veriler sunar. RPE-19 hücreleri, erken göz oluşumu ve kas kasılmasında yer alan ağları ifade etmeleri nedeniyle retinal eksplantlar ve epitelin göz gelişimindeki rolü hakkındaki anlayışımıza katkıda bulunur.

Özetle, ARPE-19 hücre hattı oftalmik araştırmalarda kritik bir model olarak hizmet etmekte ve retinanın fizyolojisi, pigmentasyon süreçleri ve oküler tedavilerin etkinliği hakkında bilgiler sunmaktadır.

Doku
Göz, retina pigmentli epiteli, retina
Eş anlamlılar
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
ARPE-19 (Cytion katalog numarası 305025)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Rpe'ye Özgü Belirteçler Cralbp ve Rpe-65
Antijen ekspresyonu
RPE'ye özgü belirteçler CRALBP ve RPE-65

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
19 yıl