Gå til innholdet
ARPE-19
Vev
Øye, retinalt pigmentert epitel, netthinne
Synonymer
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Dokumenter

ARPE-19

Cell line · Produktnummer 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

ARPE-19-cellelinjen, som stammer fra netthinnens pigmentepitel (RPE) fra en 19 år gammel mann, har funksjonelle egenskaper som ligner på opprinnelige RPE-celler, noe som gjør den til en sentral epitelcellemodell i oftalmisk forskning. Disse cellene brukes i studier knyttet til netthinnen hos virveldyr og netthinnens pigmentepitelfysiologi. Når ARPE-19-celler dyrkes i 3D-cellekultursystemer eller som et cellelag på lamininbelagte filtre med lavserummedier, oppnår ARPE-19-celler morfologisk polarisering og danner tette veikryss, noe som gir en transepitelial resistens som ligner den som observeres in vivo.

ARPE-19-celler, som uttrykker RPE-spesifikke markører som CRALBP og RPE-65, er en utmerket modell for å forstå pigmenteringsprosessene i retinalpigmentepitelet, inkludert melaninsyntese og melanosominnhold.

ARPE-19-celler kan også brukes til studier av okulær farmakokinetikk og permeabilitet, noe som gir innsikt i effekten av okulær kjemoterapi og netthinnebarrierer. Bruken av dem til å undersøke samspillet mellom farmakokinetikk og melanininnhold gir verdifulle data om binding og opptak av legemidler. RPE-19-celler bidrar til vår forståelse av netthinneeksplantater og epitelets rolle i øyets utvikling, ettersom de uttrykker nettverk som er involvert i tidlig øyedannelse og muskelsammentrekning.

ARPE-19-cellelinjen er en viktig modell i oftalmisk forskning, og den gir innsikt i netthinnens fysiologi, pigmenteringsprosesser og effekten av øyebehandlinger.

Vev
Øye, retinalt pigmentert epitel, netthinne
Synonymer
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumorinduserende
Ja

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ARPE-19 (Cytion katalognummer 305025)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Rpe-spesifikke markører Cralbp og Rpe-65
Antigenuttrykk
RPE-spesifikke markører CRALBP og RPE-65

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
19 år