Pāriet uz saturu
ARPE-19
Audums
Acs, tīklenes pigmentētais epitēlijs, tīklene
Sinonīmi
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Dokumenti

ARPE-19

Cell line · Preces numurs 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

ARPE-19 šūnu līnijai, kas iegūta no 19 gadus veca vīrieša tīklenes pigmenta epitēlija (RPE), ir funkcionālas īpašības, kas līdzīgas dabiskajām RPE šūnām, padarot to par galveno epitēlija šūnu modeli oftalmoloģijas pētījumos. Šīs šūnas tiek izmantotas pētījumos, kas saistīti ar mugurkaulnieku tīkleni un tīklenes pigmenteptēlija fizioloģiju. Kultivējot 3D šūnu kultūru sistēmās vai kā šūnu monoslānī uz filtriem ar laminīna pārklājumu, izmantojot barotni ar zemu seruma saturu, ARPE-19 šūnas sasniedz morfoloģisko polarizāciju un veido ciešus savienojumus, uzrādot transepiteliālo pretestību, kas ir līdzīga in vivo novērotajai.

ARPE-19 šūnas, kas ekspresē RPE specifiskus marķierus, piemēram, CRALBP un RPE-65, kalpo kā lielisks modelis, lai izprastu pigmentācijas procesus tīklenes pigmenta epitēlijā, tostarp melanīna sintēzi un melanosomu saturu.

ARPE-19 cilvēka šūnas var izmantot arī acu farmakokinētikas un caurlaidības pētījumos, sniedzot ieskatu acu ķīmijterapijas efektivitātes un tīklenes barjeru aspektos. To izmantošana farmakokinētikas un melanīna satura mijiedarbības izpētē sniedz vērtīgus datus par zāļu saistīšanos un uzņemšanu. RPE-19 šūnas veicina mūsu izpratni par tīklenes eksplantātiem un epitēlija lomu acs attīstībā, ņemot vērā to tīklojumu ekspresiju, kas iesaistīti agrīnā acs veidošanās procesā un muskuļu kontrakcijā.

Kopumā ARPE-19 šūnu līnija kalpo kā ļoti svarīgs modelis oftalmoloģiskajos pētījumos, sniedzot ieskatu tīklenes fizioloģijā, pigmentācijas procesos un acu ārstēšanas efektivitātē.

Audums
Acs, tīklenes pigmentētais epitēlijs, tīklene
Sinonīmi
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
ARPE-19 (Cytion kataloga numurs 305025)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Rpe specifiskie marķieri Cralbp un Rpe-65
Antigēna ekspresija
RPE specifiskie marķieri CRALBP un RPE-65

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
19 gadi