
- Kude
- Silm, võrkkesta pigmenditud epiteel, võrkkestas
- Sünonüümid
- ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200
Dokumendid
ARPE-19
Cell line · Toote number 305025
The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...
Kohandamine / Soovitused
- ARPE-19Cell line€650.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
ARPE-19 rakuliinil, mis on saadud 19-aastase mehe võrkkesta pigmentepiteelist (RPE), on funktsionaalsed omadused, mis sarnanevad emakeelsete RPE rakkude omadustega, mistõttu on see peamine epiteelirakkude mudel silmakliiniku uuringutes. Neid rakke kasutatakse selgroogsete võrkkesta ja võrkkesta pigmentepiteeli füsioloogiaga seotud uuringutes. Kui ARPE-19 rakke kasvatatakse 3D-rakukultuurisüsteemides või rakkude monokihina lamiiniga kaetud filtritel vähese seerumiga keskkonnas, saavutavad nad morfoloogilise polarisatsiooni ja moodustavad tihedaid ühendusi, näidates transsepiteeli vastupanu, mis on sarnane in vivo täheldatud vastupanuga.
ARPE-19 rakud, mis ekspresseerivad RPE-spetsiifilisi markereid, nagu CRALBP ja RPE-65, on suurepärane mudel võrkkesta pigmendiepiteeli pigmentatsiooniprotsesside, sealhulgas melaniini sünteesi ja melanosoomide sisalduse mõistmiseks.
Inimese ARPE-19 rakkude kasutamine laieneb silmade farmakokineetika ja läbilaskvuse uuringutele, andes ülevaate silmade keemiaravi tõhususest ja võrkkesta barjääride kaalutlustest. Nende kasutamine farmakokineetika ja melaniinisisalduse vaheliste vastastikmõjude uurimisel pakub väärtuslikke andmeid ravimi sidumise ja omastamise kohta. RPE-19 rakud aitavad kaasa meie arusaamisele võrkkesta ekspluateerimisest ja epiteeli rollist silma arengus, arvestades nende ekspressiooni võrgustikes, mis on seotud varase silma moodustamise ja lihaste kokkutõmbumisega.
Kokkuvõttes on ARPE-19 rakuliin oluline mudel silmauuringutes, andes ülevaate võrkkesta füsioloogiast, pigmentatsiooniprotsessidest ja silmaravi tõhususest.
- Kude
- Silm, võrkkesta pigmenditud epiteel, võrkkestas
- Sünonüümid
- ARPE19
- Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
- NTC-200
- NTC200
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteel
- Tuumorigeenne
- Jah
04Tunnused
- Viide
- ARPE-19 (Cytioni katalooginumber 305025)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0145
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Valgu ekspressioon
- Rpe-spetsiifilised markerid Cralbp ja Rpe-65
- Antigeeni ekspressioon
- RPE-spetsiifilised markerid CRALBP ja RPE-65
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 19 aastat
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah