Mine otse sisu juurde
ARPE-19
Kude
Silm, võrkkesta pigmenditud epiteel, võrkkestas
Sünonüümid
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Dokumendid

ARPE-19

Cell line · Toote number 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

ARPE-19 rakuliinil, mis on saadud 19-aastase mehe võrkkesta pigmentepiteelist (RPE), on funktsionaalsed omadused, mis sarnanevad emakeelsete RPE rakkude omadustega, mistõttu on see peamine epiteelirakkude mudel silmakliiniku uuringutes. Neid rakke kasutatakse selgroogsete võrkkesta ja võrkkesta pigmentepiteeli füsioloogiaga seotud uuringutes. Kui ARPE-19 rakke kasvatatakse 3D-rakukultuurisüsteemides või rakkude monokihina lamiiniga kaetud filtritel vähese seerumiga keskkonnas, saavutavad nad morfoloogilise polarisatsiooni ja moodustavad tihedaid ühendusi, näidates transsepiteeli vastupanu, mis on sarnane in vivo täheldatud vastupanuga.

ARPE-19 rakud, mis ekspresseerivad RPE-spetsiifilisi markereid, nagu CRALBP ja RPE-65, on suurepärane mudel võrkkesta pigmendiepiteeli pigmentatsiooniprotsesside, sealhulgas melaniini sünteesi ja melanosoomide sisalduse mõistmiseks.

Inimese ARPE-19 rakkude kasutamine laieneb silmade farmakokineetika ja läbilaskvuse uuringutele, andes ülevaate silmade keemiaravi tõhususest ja võrkkesta barjääride kaalutlustest. Nende kasutamine farmakokineetika ja melaniinisisalduse vaheliste vastastikmõjude uurimisel pakub väärtuslikke andmeid ravimi sidumise ja omastamise kohta. RPE-19 rakud aitavad kaasa meie arusaamisele võrkkesta ekspluateerimisest ja epiteeli rollist silma arengus, arvestades nende ekspressiooni võrgustikes, mis on seotud varase silma moodustamise ja lihaste kokkutõmbumisega.

Kokkuvõttes on ARPE-19 rakuliin oluline mudel silmauuringutes, andes ülevaate võrkkesta füsioloogiast, pigmentatsiooniprotsessidest ja silmaravi tõhususest.

Kude
Silm, võrkkesta pigmenditud epiteel, võrkkestas
Sünonüümid
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
ARPE-19 (Cytioni katalooginumber 305025)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Rpe-spetsiifilised markerid Cralbp ja Rpe-65
Antigeeni ekspressioon
RPE-spetsiifilised markerid CRALBP ja RPE-65

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
19 aastat