ARPE-19

La linea cellulare ARPE-19, derivata dall'epitelio pigmentato retinico (RPE) di un uomo di 19 anni, ha caratteristiche funzionali simili alle cellule RPE native, che la rendono un modello di cellula epiteliale fondamentale nella ricerca oftalmica. Queste cellule sono utilizzate negli studi sulla retina dei vertebrati e sulla fisiologia dell'epitelio pigmentato retinico. Quando vengono coltivate in sistemi di coltura cellulare 3D o come monostrato cellulare su filtri rivestiti di laminina con mezzi a basso contenuto di siero, le cellule ARPE-19 raggiungono una polarizzazione morfologica e formano giunzioni strette, mostrando una resistenza transepiteliale simile a quella osservata in vivo.

Le cellule ARPE-19, che esprimono marcatori specifici dell'RPE come CRALBP e RPE-65, rappresentano un modello eccellente per comprendere i processi di pigmentazione dell'epitelio pigmentato retinico, tra cui la sintesi di melanina e il contenuto di melanosomi.

L'applicazione delle cellule umane ARPE-19 si estende agli studi di farmacocinetica e permeabilità oculare, fornendo approfondimenti sull'efficacia della chemioterapia oculare e sulle considerazioni relative alle barriere retiniche. Il loro uso per esaminare le interazioni tra farmacocinetica e contenuto di melanina offre dati preziosi sul legame e l'assorbimento dei farmaci. Le cellule RPE-19 contribuiscono alla comprensione degli espianti retinici e del ruolo dell'epitelio nello sviluppo dell'occhio, grazie alla loro espressione di reti coinvolte nella formazione precoce dell'occhio e nella contrazione muscolare.

In sintesi, la linea cellulare ARPE-19 è un modello fondamentale per la ricerca oftalmica, in quanto offre approfondimenti sulla fisiologia della retina, sui processi di pigmentazione e sull'efficacia dei trattamenti oculari.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia