Přejít na obsah
ARPE-19
Tkáň
Oko, sítnicový pigmentový epitel, sítnice
Synonyma
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Dokumenty

ARPE-19

Cell line · Číslo výrobku 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie ARPE-19, odvozená z retinálního pigmentového epitelu (RPE) 19letého muže, má funkční vlastnosti podobné nativním buňkám RPE, což z ní činí klíčový model epiteliálních buněk v očním výzkumu. Tyto buňky se využívají ve studiích týkajících se sítnice obratlovců a fyziologie pigmentového epitelu sítnice. Při kultivaci v 3D buněčných kultivačních systémech nebo jako buněčná monovrstva na lamininem potažených filtrech s médiem s nízkým obsahem séra dosahují buňky ARPE-19 morfologické polarizace a vytvářejí těsné spoje a vykazují transepiteliální rezistenci podobnou té, která je pozorována in vivo.

Buňky ARPE-19, které exprimují markery specifické pro RPE, jako jsou CRALBP a RPE-65, slouží jako vynikající model pro pochopení pigmentačních procesů pigmentového epitelu sítnice, včetně syntézy melaninu a obsahu melanosomů.

Použití lidských buněk ARPE-19 se rozšiřuje na studie oční farmakokinetiky a propustnosti, což umožňuje nahlédnout do účinnosti oční chemoterapie a zohlednit bariéry sítnice. Jejich použití při zkoumání interakcí mezi farmakokinetikou a obsahem melaninu nabízí cenné údaje o vazbě a příjmu léčiv. Buňky RPE-19 přispívají k našemu chápání explantátů sítnice a úlohy epitelu ve vývoji oka vzhledem k jejich expresi sítí zapojených do rané tvorby oka a svalové kontrakce.

Celkově lze říci, že buněčná linie ARPE-19 slouží jako zásadní model v očním výzkumu a nabízí poznatky o fyziologii sítnice, pigmentačních procesech a účinnosti očních léčebných postupů.

Tkáň
Oko, sítnicový pigmentový epitel, sítnice
Synonyma
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Tumorogenní
Ano

04Identifikátory

Citace
ARPE-19 (katalogové číslo Cytion 305025)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Markery specifické pro Rpe Cralbp a Rpe-65
Exprese antigenu
Specifické markery RPE CRALBP a RPE-65

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
19 let