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ARPE-19
ティッシュ
眼、網膜色素上皮、網膜
同義語
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

ARPE-19

Cell line · 製品番号 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

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01概要

説明

ARPE-19細胞株は、19歳男性の網膜色素上皮(RPE)に由来し、本来のRPE細胞と同様の機能的特徴を有しており、眼科研究において極めて重要な上皮細胞モデルとなっている。これらの細胞は、脊椎動物の網膜や網膜色素上皮の生理学に関連する研究に利用されている。ARPE-19細胞は、低血清培地を用いて3次元細胞培養系で、あるいはラミニンコートフィルター上で細胞単層として培養すると、形態学的に極性を獲得し、タイトジャンクションを形成して、生体内で観察されるのと同様の経上皮抵抗性を示す。

CRALBPやRPE-65などのRPE特異的マーカーを発現するARPE-19細胞は、メラニン合成やメラノソーム含量など、網膜色素上皮の色素沈着プロセスを理解するための優れたモデルとして役立つ。

ARPE-19ヒト細胞の応用は、眼内薬物動態および透過性研究にも及び、眼化学療法の有効性および網膜バリアに関する考察を提供している。薬物動態とメラニン含量との相互作用の研究に用いることで、薬物の結合と取り込みに関する貴重なデータが得られる。RPE-19細胞は、初期の眼球形成と筋収縮に関与するネットワークを発現していることから、網膜摘出と眼球発生における上皮の役割の理解に貢献している。

まとめると、ARPE-19細胞株は眼科研究において重要なモデルとして機能しており、網膜の生理学、色素形成過程、眼科治療の有効性に関する洞察を提供している。

ティッシュ
眼、網膜色素上皮、網膜
同義語
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
腫瘍形成性
はい

04識別子

引用
ARPE-19(Cytion カタログ番号 305025)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0145

05発現と感受性

タンパク質の発現
Rpe特異的マーカーCralbpとRpe-65
抗原発現
RPE特異的マーカーCRALBPとRPE-65

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
19年