
- Tissue
- Ojo, epitelio pigmentario de la retina, retina
- Synonyms
- ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200
Documents
ARPE-19
Cell line · Product number 305025
The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...
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01General information
- Description
La línea celular ARPE-19, derivada del epitelio pigmentario retiniano (EPR) de un hombre de 19 años, presenta características funcionales similares a las de las células nativas del EPR, lo que la convierte en un modelo celular epitelial fundamental en la investigación oftalmológica. Estas células se utilizan en estudios relacionados con la retina de los vertebrados y la fisiología del epitelio pigmentario retiniano. Cuando se cultivan en sistemas de cultivo celular 3D o como una monocapa celular sobre filtros recubiertos de laminina con medios de bajo contenido de suero, las células ARPE-19 logran la polarización morfológica y forman uniones estrechas, mostrando una resistencia transepitelial similar a la observada in vivo.
Las células ARPE-19, que expresan marcadores específicos del EPR como CRALBP y RPE-65, sirven como un excelente modelo para comprender los procesos de pigmentación del epitelio pigmentario retiniano, incluyendo la síntesis de melanina y el contenido de melanosomas.
La aplicación de las células humanas ARPE-19 se extiende a estudios de farmacocinética ocular y permeabilidad, lo que brinda información sobre la eficacia de la quimioterapia ocular y consideraciones sobre las barreras retinianas. Su uso en el análisis de las interacciones entre la farmacocinética y el contenido de melanina ofrece datos valiosos sobre la unión y la absorción de fármacos. Las células RPE-19 contribuyen a nuestra comprensión de los explantes retinianos y del papel del epitelio en el desarrollo ocular, dada su expresión de redes involucradas en la formación temprana del ojo y la contracción muscular.
En resumen, la línea celular ARPE-19 sirve como un modelo fundamental en la investigación oftálmica, ofreciendo información sobre la fisiología de la retina, los procesos de pigmentación y la eficacia de los tratamientos oculares.
- Tissue
- Ojo, epitelio pigmentario de la retina, retina
- Synonyms
- ARPE19
- Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
- NTC-200
- NTC200
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Epithelial
- Tumourigenic
- Sí
04Identifiers
- Citation
- ARPE-19 (número de catálogo de Cytion 305025)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0145
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Marcadores específicos de la RPE: Cralbp y RPE-65
- Antigen expression
- Marcadores específicos del EPR: CRALBP y RPE-65
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 19 años
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes