Gå direkte til indholdet
ARPE-19
Væv
Øje, retinalt pigmenteret epitel, nethinde
Synonymer
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Dokumenter

ARPE-19

Cell line · Varenummer 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

ARPE-19-cellelinjen, der stammer fra retinalpigmentepitelet (RPE) hos en 19-årig mand, har funktionelle egenskaber, der ligner de oprindelige RPE-celler, hvilket gør den til en central epitelcellemodel i oftalmisk forskning. Disse celler bruges i undersøgelser af hvirveldyrs nethinde og retinal pigmentepithelets fysiologi. Når ARPE-19-celler dyrkes i 3D-cellekultursystemer eller som et cellelag på lamininbelagte filtre med lavserummedier, opnår de morfologisk polarisering og danner tætte forbindelser, der udviser transepitelial modstand i lighed med den, der observeres in vivo.

ARPE-19-celler, der udtrykker RPE-specifikke markører som CRALBP og RPE-65, er en fremragende model til at forstå pigmenteringsprocesserne i retinalpigmentepitelet, herunder melaninsyntese og melanosomindhold.

Anvendelsen af ARPE-19 humane celler strækker sig til okulær farmakokinetik og permeabilitetsundersøgelser, hvilket giver indsigt i okulær kemoterapi-effektivitet og overvejelser om retinale barrierer. Brugen af dem til at undersøge samspillet mellem farmakokinetik og melaninindhold giver værdifulde data om lægemiddelbinding og -optagelse. RPE-19-celler bidrager til vores forståelse af nethindeeksplantater og epitelets rolle i øjets udvikling på grund af deres udtryk for netværk, der er involveret i tidlig øjendannelse og muskelsammentrækning.

Sammenfattende fungerer ARPE-19-cellelinjen som en kritisk model i oftalmisk forskning og giver indsigt i nethindens fysiologi, pigmenteringsprocesser og effekten af okulære behandlinger.

Væv
Øje, retinalt pigmenteret epitel, nethinde
Synonymer
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Tumorfremkaldende
Yeees

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ARPE-19 (Cytion-katalognummer 305025)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Rpe-specifikke markører Cralbp og Rpe-65
Antigenudtryk
RPE-specifikke markører CRALBP og RPE-65

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
19 år