الانتقال إلى المحتوى
ARPE-19
الأنسجة
العين، ظهارة شبكية العين المصطبغة، شبكية العين
المرادفات
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

المستندات

ARPE-19

Cell line · رقم المنتج 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يتميز خط خلايا ARPE-19، المشتق من الظهارة الصبغية الشبكية (RPE) لذكر يبلغ من العمر 19 عاماً، بخصائص وظيفية مشابهة لخلايا الظهارة الصبغية الشبكية الأصلية، مما يجعله نموذجاً محورياً للخلايا الظهارية في أبحاث طب العيون. تُستخدم هذه الخلايا في الدراسات المتعلقة بشبكية العين الفقارية وفسيولوجيا الظهارة الصبغية للشبكية. عند استزراعها في أنظمة زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد أو كطبقة أحادية الخلية على مرشحات مغلفة باللامينين مع وسائط منخفضة المصل، تحقق خلايا ARPE-19 استقطابًا مورفولوجيًا وتشكل وصلات محكمة، مما يُظهر مقاومة عبر الظهارة تشبه تلك التي لوحظت في الجسم الحي.

تُستخدم خلايا ARPE-19، التي تعبر عن علامات خاصة بالظهارة الصبغية للشبكية مثل CRALBP و RPE-65، كنموذج ممتاز لفهم عمليات تصبغ الظهارة الصبغية للشبكية، بما في ذلك تخليق الميلانين ومحتوى الميلانوسوم.

يمتد تطبيق خلايا ARPE-19 البشرية إلى دراسات الحرائك الدوائية للعين ونفاذية العين، مما يوفر رؤى حول فعالية العلاج الكيميائي للعين واعتبارات الحواجز الشبكية. ويوفر استخدامها في فحص التفاعلات بين الحرائك الدوائية ومحتوى الميلانين بيانات قيّمة عن ارتباط الدواء وامتصاصه. وتساهم خلايا RPE-19 في فهمنا لخلايا الشبكية المستخرجة من الشبكية ودور الظهارة في نمو العين، نظراً لتعبيرها عن الشبكات المشاركة في تكوين العين المبكر وتقلص العضلات.

وباختصار، يُستخدم خط خلايا (ARPE-19) كنموذج مهم في أبحاث طب العيون، حيث يقدم رؤى حول فسيولوجيا الشبكية وعمليات التصبغ وفعالية علاجات العين.

الأنسجة
العين، ظهارة شبكية العين المصطبغة، شبكية العين
المرادفات
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم

04المعرّفات

المرجع
ARPE-19 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305025)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0145

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
العلامات الخاصة بال Rpe Cralbp و Rpe-65
التعبير عن المستضد
الواسمان الخاصان بـ CRALBP وRPE-65

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
19 سنة