Tartalomra ugrás
ARPE-19
Szövet
Szem, retina pigmentált epithelium, retina
Szinonimák
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Dokumentumok

ARPE-19

Cell line · Termékszám 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az ARPE-19 sejtvonal, amely egy 19 éves férfi retinális pigment epitheléből (RPE) származik, funkcionális tulajdonságai hasonlítanak a natív RPE sejtekéhez, így a szemészeti kutatások kulcsfontosságú epithelsejt modellje. Ezeket a sejteket a gerincesek retinájával és a retinális pigmenthám fiziológiájával kapcsolatos vizsgálatokban használják. 3D-s sejttenyésztési rendszerekben vagy lamininnel bevont szűrőkön, alacsony szérumtartalmú táptalajon, sejtmonorétegként tenyésztve az ARPE-19 sejtek morfológiai polarizációt érnek el és szoros kötéseket képeznek, az in vivo megfigyelt transzepithelialis rezisztenciát mutatva.

Az ARPE-19 sejtek, amelyek RPE-specifikus markereket, például CRALBP-t és RPE-65-öt expresszálnak, kiváló modellként szolgálnak a retinális pigmenthám pigmentációs folyamatainak megértéséhez, beleértve a melaninszintézist és a melanoszómák tartalmát.

Az ARPE-19 humán sejtek alkalmazása kiterjed az okuláris farmakokinetikai és permeabilitási vizsgálatokra, betekintést nyújtva az okuláris kemoterápia hatékonyságába és a retinális gátakkal kapcsolatos megfontolásokba. A farmakokinetika és a melanintartalom közötti kölcsönhatások vizsgálatára való felhasználásuk értékes adatokat nyújt a gyógyszerek kötődéséről és felvételéről. Az RPE-19 sejtek hozzájárulnak a retinális explantátumok és a hám szemfejlődésben betöltött szerepének megértéséhez, mivel a korai szemképződésben és az izomösszehúzódásban részt vevő hálózatok expresszióját mutatják.

Összefoglalva, az ARPE-19 sejtvonal kritikus modellként szolgál a szemészeti kutatásban, betekintést nyújtva a retina fiziológiájába, a pigmentációs folyamatokba és a szemészeti kezelések hatékonyságába.

Szövet
Szem, retina pigmentált epithelium, retina
Szinonimák
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
ARPE-19 (Cytion katalógusszám: 305025)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Rpe-specifikus markerek Cralbp és Rpe-65
Antigén-expresszió
RPE-specifikus CRALBP és RPE-65 markerek

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
19 év