- Tkivo
- Oko, pigmentni epitelij mrežnice, mrežnica
- Sinonimi
- ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200
Dokumenti
ARPE-19
Cell line · Številka izdelka 305025
The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...
Prilagajanje / Priporočila
- ARPE-19Cell line€650.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija ARPE-19, pridobljena iz pigmentnega epitela mrežnice (RPE) 19-letnega moškega, ima funkcionalne značilnosti, podobne kot naravne celice RPE, zato je ključni model epitelijskih celic v oftalmoloških raziskavah. Te celice se uporabljajo v študijah, povezanih z mrežnico vretenčarjev in fiziologijo pigmentnega epitelija mrežnice. Pri gojenju v 3D-sistemih celičnih kultur ali kot celični monosloj na filtrih, prevlečenih z lamininom, z mediji z nizko vsebnostjo seruma, celice ARPE-19 dosežejo morfološko polarizacijo in tvorijo tesne povezave, pri čemer se kaže transepitelijska odpornost, podobna tisti, ki jo opazimo in vivo.
Celice ARPE-19, ki izražajo markerje, značilne za RPE, kot sta CRALBP in RPE-65, so odličen model za razumevanje pigmentacijskih procesov pigmentnega epitelija mrežnice, vključno s sintezo melanina in vsebnostjo melanosomov.
Uporaba človeških celic ARPE-19 je razširjena na študije očesne farmakokinetike in prepustnosti, kar omogoča vpogled v učinkovitost očesne kemoterapije in pregrade mrežnice. Njihova uporaba pri preučevanju interakcij med farmakokinetiko in vsebnostjo melanina ponuja dragocene podatke o vezavi in privzemu zdravil. Celice RPE-19 prispevajo k razumevanju eksplantatov mrežnice in vloge epitelija pri razvoju očesa, saj izražajo mreže, ki sodelujejo pri zgodnjem oblikovanju očesa in krčenju mišic.
Če povzamemo, celična linija ARPE-19 služi kot ključni model v oftalmoloških raziskavah, saj omogoča vpogled v fiziologijo mrežnice, procese pigmentacije in učinkovitost zdravljenja oči.
- Tkivo
- Oko, pigmentni epitelij mrežnice, mrežnica
- Sinonimi
- ARPE19
- Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
- NTC-200
- NTC200
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijski
- Tumorigeničen
- Da
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- ARPE-19 (kataloška številka Cytion 305025)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0145
05Izražanje in dovzetnost
- Ekspresija beljakovin
- Specifični označevalci Rpe Cralbp in Rpe-65
- Ekspresija antigena
- Za RPE specifična označevalca CRALBP in RPE-65
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 19 let
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da