Skip to content
ARPE-19
Tissue
ตา, เยื่อบุผิวเม็ดสีของจอประสาทตา, จอประสาทตา
Synonyms
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Documents

ARPE-19

Cell line · Product number 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ ARPE-19 ซึ่งได้มาจากเยื่อบุผิวเม็ดสีของจอประสาทตา (RPE) ของชายอายุ 19 ปี มีลักษณะการทำงานที่คล้ายคลึงกับเซลล์ RPE ธรรมชาติ ทำให้เป็นแบบจำลองเซลล์เยื่อบุผิวที่สำคัญในการวิจัยด้านจักษุวิทยา เซลล์เหล่านี้ถูกนำไปใช้ในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับจอประสาทตาของสัตว์มีกระดูกสันหลังและสรีรวิทยาของเยื่อบุผิวเม็ดสีของจอประสาทตาเมื่อเพาะเลี้ยงในระบบเพาะเลี้ยงเซลล์ 3 มิติ หรือเป็นเซลล์ชั้นเดียวบนตัวกรองที่เคลือบด้วยแลมิเนนในสื่อที่มีซีรัมต่ำ เซลล์ ARPE-19 จะเกิดการแบ่งขั้วทางสัณฐานวิทยาและสร้างรอยต่อที่แน่นหนา แสดงให้เห็นถึงความต้านทานแบบข้ามเยื่อบุผิวที่คล้ายคลึงกับที่พบในร่างกาย

เซลล์ ARPE-19 ที่แสดงเครื่องหมายเฉพาะของเซลล์ RPE เช่น CRALBP และ RPE-65 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการทำความเข้าใจกระบวนการสร้างเม็ดสีของเยื่อบุผิวเม็ดสีของจอประสาทตา รวมถึงการสังเคราะห์เมลานินและปริมาณเมลานโซม

การประยุกต์ใช้เซลล์มนุษย์ ARPE-19 ขยายไปถึงการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์และการซึมผ่านในดวงตา ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับประสิทธิภาพของการรักษาด้วยเคมีบำบัดในดวงตาและข้อพิจารณาเกี่ยวกับอุปสรรคของจอประสาทตา การใช้เซลล์เหล่านี้ในการตรวจสอบปฏิสัมพันธ์ระหว่างเภสัชจลนศาสตร์และปริมาณเมลานินให้ข้อมูลที่มีค่าเกี่ยวกับการจับและการดูดซึมยา เซลล์ RPE-19 มีส่วนช่วยในการทำความเข้าใจเกี่ยวกับชิ้นเนื้อจอประสาทตาและการพัฒนาของเยื่อบุผิวในดวงตา เนื่องจากมีการแสดงออกของเครือข่ายที่เกี่ยวข้องกับการสร้างดวงตาในระยะเริ่มต้นและการหดตัวของกล้ามเนื้อ

โดยสรุป สายเซลล์ ARPE-19 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่สำคัญในการวิจัยด้านจักษุวิทยา โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับสรีรวิทยาของจอประสาทตา กระบวนการสร้างเม็ดสี และประสิทธิภาพของการรักษาทางตา

Tissue
ตา, เยื่อบุผิวเม็ดสีของจอประสาทตา, จอประสาทตา
Synonyms
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
ARPE-19 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305025)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Expression and susceptibility

Protein expression
เครื่องหมายเฉพาะของเซลล์เรตินา (RPE) Cralbp และ Rpe-65
Antigen expression
เครื่องหมายเฉพาะของเซลล์เรตินา CRALBP และ RPE-65

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
19 ปี