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ARPE-19
Gewebe
Auge, retinales Pigmentepithel, Netzhaut
Synonyme
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

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ARPE-19

Cell line · Artikelnummer 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die ARPE-19-Zelllinie, die aus dem retinalen Pigmentepithel (RPE) eines 19-jährigen Mannes gewonnen wird, weist funktionelle Eigenschaften auf, die den nativen RPE-Zellen ähneln, was sie zu einem zentralen Epithelzellmodell in der Augenforschung macht. Diese Zellen werden in Studien über die Netzhaut von Wirbeltieren und die Physiologie des retinalen Pigmentepithels verwendet. Wenn sie in 3D-Zellkultursystemen oder als Monolayer auf Laminin-beschichteten Filtern mit serumarmen Medien kultiviert werden, erreichen ARPE-19-Zellen eine morphologische Polarisierung und bilden tight junctions, die eine transepitheliale Resistenz aufweisen, die der in vivo beobachteten ähnelt.

ARPE-19-Zellen, die RPE-spezifische Marker wie CRALBP und RPE-65 exprimieren, dienen als hervorragendes Modell für das Verständnis der Pigmentierungsprozesse des retinalen Pigmentepithels, einschließlich der Melaninsynthese und des Melanosomengehalts.

Die Anwendung menschlicher ARPE-19-Zellen erstreckt sich auf Studien zur okulären Pharmakokinetik und Permeabilität, die Einblicke in die Wirksamkeit okulärer Chemotherapien und Überlegungen zur Netzhautbarriere liefern. Ihr Einsatz bei der Untersuchung der Wechselwirkungen zwischen Pharmakokinetik und Melaningehalt liefert wertvolle Daten zur Medikamentenbindung und -aufnahme. RPE-19-Zellen tragen zu unserem Verständnis von Netzhautexplantaten und der Rolle des Epithels bei der Augenentwicklung bei, da sie Netzwerke exprimieren, die an der frühen Augenbildung und Muskelkontraktion beteiligt sind.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die ARPE-19-Zelllinie ein wichtiges Modell in der Augenforschung darstellt, das Einblicke in die Physiologie der Netzhaut, in Pigmentierungsprozesse und in die Wirksamkeit von Augenbehandlungen bietet.

Gewebe
Auge, retinales Pigmentepithel, Netzhaut
Synonyme
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Ja

04Bezeichner

Quellenangabe
ARPE-19 (Cytion-Katalognummer 305025)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0145

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Rpe-spezifische Marker Cralbp und Rpe-65
Antigenexpression
RPE-spezifische Marker CRALBP und RPE-65

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
19 Jahre