Μετάβαση στο περιεχόμενο
ARPE-19
Ιστός
Μάτι, μελαγχρωματικό επιθήλιο του αμφιβληστροειδούς, αμφιβληστροειδής
Συνώνυμα
ARPE19, Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19, NTC-200, NTC200

Έγγραφα

ARPE-19

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305025

The ARPE-19 cell line, derived from the retinal pigment epithelium (RPE) of a 19-year-old male, has functional characteristics akin to native RPE cells, m...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά ARPE-19, που προέρχεται από το επιθήλιο της χρωστικής του αμφιβληστροειδούς (RPE) ενός 19χρονου άνδρα, έχει λειτουργικά χαρακτηριστικά παρόμοια με τα εγγενή κύτταρα RPE, καθιστώντας την ένα βασικό μοντέλο επιθηλιακών κυττάρων στην οφθαλμολογική έρευνα. Τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται σε μελέτες που σχετίζονται με τον αμφιβληστροειδή των σπονδυλωτών και τη φυσιολογία του επιθηλίου της χρωστικής του αμφιβληστροειδούς. Όταν καλλιεργούνται σε τρισδιάστατα συστήματα κυτταροκαλλιέργειας ή ως κυτταρική μονοστιβάδα σε φίλτρα επικαλυμμένα με λαμινίνη με μέσο χαμηλής περιεκτικότητας σε ορό, τα κύτταρα ARPE-19 επιτυγχάνουν μορφολογική πόλωση και σχηματίζουν στενές συνδέσεις, επιδεικνύοντας διαμεσοεπιθηλιακή αντίσταση παρόμοια με αυτή που παρατηρείται in vivo.

Τα κύτταρα ARPE-19, που εκφράζουν ειδικούς δείκτες RPE, όπως CRALBP και RPE-65, χρησιμεύουν ως ένα εξαιρετικό μοντέλο για την κατανόηση των διαδικασιών μελάγχρωσης του μελαγχρωματικού επιθηλίου του αμφιβληστροειδούς, συμπεριλαμβανομένης της σύνθεσης μελανίνης και της περιεκτικότητας σε μελανοσώματα.

Η εφαρμογή των ανθρώπινων κυττάρων ARPE-19 επεκτείνεται σε μελέτες οφθαλμικής φαρμακοκινητικής και διαπερατότητας, παρέχοντας πληροφορίες σχετικά με την αποτελεσματικότητα της οφθαλμικής χημειοθεραπείας και τα ζητήματα των φραγμών του αμφιβληστροειδούς. Η χρήση τους για την εξέταση των αλληλεπιδράσεων μεταξύ φαρμακοκινητικής και περιεκτικότητας σε μελανίνη προσφέρει πολύτιμα δεδομένα σχετικά με τη δέσμευση και την πρόσληψη φαρμάκων. Τα κύτταρα RPE-19 συμβάλλουν στην κατανόηση των εξεργασιών του αμφιβληστροειδούς και του ρόλου του επιθηλίου στην ανάπτυξη του οφθαλμού, δεδομένης της έκφρασης δικτύων που εμπλέκονται στον πρώιμο σχηματισμό του οφθαλμού και στη μυϊκή συστολή.

Συνοπτικά, η κυτταρική σειρά ARPE-19 χρησιμεύει ως ένα κρίσιμο μοντέλο στην οφθαλμολογική έρευνα, προσφέροντας γνώσεις σχετικά με τη φυσιολογία του αμφιβληστροειδούς, τις διεργασίες μελάγχρωσης και την αποτελεσματικότητα των οφθαλμολογικών θεραπειών.

Ιστός
Μάτι, μελαγχρωματικό επιθήλιο του αμφιβληστροειδούς, αμφιβληστροειδής
Συνώνυμα
  • ARPE19
  • Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19
  • NTC-200
  • NTC200

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Ογκογόνος
Ναι

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
ARPE-19 (αριθμός καταλόγου Cytion 305025)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0145

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
Rpe-ειδικοί δείκτες Cralbp και Rpe-65
Έκφραση αντιγόνου
Ειδικοί δείκτες CRALBP και RPE-65 για το RPE

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
19 χρόνια