LS513

La lignée cellulaire LS513 est un modèle de carcinome colorectal bien caractérisé, dérivé d'une biopsie tumorale primaire prélevée en 1985 sur un patient caucasien de 63 ans. La tumeur a été classée comme un carcinome cæcal sécrétant de la mucine de type C selon la classification de Dukes, situé au niveau de la valve de Bauhin. Les cellules LS513 sont de nature adhérente et ont démontré une multirésistance aux médicaments (MDR), ce qui en fait un modèle précieux pour l'étude des mécanismes de résistance aux médicaments dans le cancer colorectal. Ces cellules présentent une efficacité de formation de colonies de 30 % dans la méthylcellulose et sont tumorigènes chez les souris nues, ce qui valide davantage leur utilisation dans les études oncogéniques.

Au niveau génétique, les cellules LS513 présentent plusieurs caractéristiques notables. Elles sont positives pour l'oncogène p53 de type sauvage et expriment l'antigène carcino-embryonnaire (CEA) sur environ 50 % des cellules. De plus, les cellules LS513 expriment les antigènes du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe I, notamment HLA et bêta 2 microglobuline, mais ne possèdent pas les antigènes CMH de classe II (HLA-DR, DQ et DP). Les cellules produisent également le facteur de croissance transformant bêta 1 (TGF bêta-1) à un taux de 83 pg pour 10⁶ cellules par 24 heures. Il convient de noter que le TGF bêta-1 agit comme un inhibiteur de la prolifération des cellules LS513, tandis que le TGF bêta-2 n'a pas d'effet significatif sur leur croissance. Par rapport à la lignée cellulaire LS1034, les cellules LS513 sont 100 fois moins sensibles au TGF bêta-1, ce qui indique des réponses distinctes à la signalisation des facteurs de croissance entre ces deux modèles de carcinome colorectal.

Les cellules LS513 présentent un profil unique d'expression antigénique, avec une forte positivité pour la molécule d'adhésion intercellulaire 1 (ICAM-1) et les antigènes HLA de classe I. L'absence d'expression de l'antigène MHC de classe II est particulièrement remarquable, car elle suggère l'existence de mécanismes potentiels d'évasion immunitaire qui pourraient être pertinents pour la progression et les métastases du cancer colorectal. Ces caractéristiques, associées à leur résistance à plusieurs médicaments et à leur capacité à former des tumeurs chez des souris immunodéprimées, font des cellules LS513 un outil puissant pour étudier les fondements moléculaires et cellulaires du cancer colorectal, en particulier dans le contexte des interactions immunitaires et de la résistance thérapeutique.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie