LS513
Cell line · Produktnummer 300457
The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...
Tilpasning / Anbefalinger
- LS513Cell line€650.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
LS513-cellelinjen er en velkjent kolorektal karsinommodell avledet fra en primær tumorbiopsi tatt i 1985 fra en 63 år gammel kaukasisk mannlig pasient. Tumoren ble klassifisert som et Dukes' C mucin-sekreterende cecal karsinom lokalisert ved Bauhin-ventilen. LS513-celler er av natur vedheftende og har vist multiresistens (MDR), noe som gjør dem til en verdifull modell for å studere mekanismer for legemiddelresistens i kolorektal kreft. Disse cellene viser en 30 % kolonidannende effektivitet i metylcellulose og er tumorigeniske i nakne mus, noe som ytterligere bekrefter deres bruk i onkogene studier.
På genetisk nivå uttrykker LS513-celler flere bemerkelsesverdige egenskaper. De er positive for p53-villtype-onkogenet og uttrykker karsinoembryonalt antigen (CEA) på omtrent 50 % av cellene. I tillegg uttrykker LS513-celler major histocompatibility complex (MHC) klasse I-antigener, inkludert HLA og beta 2-mikroglobulin, men mangler MHC klasse II-antigener (HLA-DR, DQ og DP). Cellene produserer også transformerende vekstfaktor beta 1 (TGF beta-1) med en hastighet på 83 pg per 106 celler per 24 timer. Det er verdt å merke seg at TGF beta-1 virker som en hemmer av LS513-celleproliferasjon, mens TGF beta-2 ikke har noen signifikant effekt på deres vekst. Sammenlignet med LS1034-cellelinjen er LS513-celler 100 ganger mindre følsomme for TGF beta-1, noe som indikerer forskjellige responser på vekstfaktorsignalering mellom disse to kolorektale karsinommodellene.
LS513-celler viser et unikt profil av antigenuttrykk, med sterk positivitet for intercellulært adhesjonsmolekyl 1 (ICAM-1) og HLA klasse I-antigener. Mangelen på MHC klasse II-antigenuttrykk er spesielt bemerkelsesverdig, da det tyder på potensielle immununnvikelsesmekanismer som kan være relevante for progresjon og metastase av kolorektal kreft. Disse egenskapene, sammen med deres resistens mot flere legemidler og deres evne til å danne svulster i immunsvekkede mus, gjør LS513-celler til et kraftig verktøy for å studere de molekylære og cellulære grunnlagene for kolorektal kreft, spesielt i sammenheng med immuninteraksjoner og terapeutisk resistens.
- Vev
- Kolorektal
- Sykdom
- Adenokarsinom
- Synonymer
- LS513
- LS 513
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Tumorinduserende
- Ja, danner svulster i nakne mus
- Karyotype
- Det kan skilles mellom to stamlinjer. Den viktigste var representert i 65 % av cellene, med et modalt antall på 51,xY og 3 markører, M1 - der(1)t(1,15), M2 - der(2)t(2,3)der(3)t(2,3), M3, og en monosomi 15. Den andre stamlinjen hadde et modalt kromosomnummer på 52,xY og presenterte M2 og M3 pluss et isokromosom for den lange armen av kromosom 1 kalt M4. En trisomi 5,7, en tetrasomi 13 og en monosomi 2 og 3 var til stede i alle de analyserte cellene, men linjen hadde ikke monosomi 15.
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- LS513 (Cytion-katalognummer 300457)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1386
05Uttrykk og mottakelighet
- Proteinekspresjon
- CEA+ (50 %), p53+
- Antigenuttrykk
- Karsinoembryonalt antigen (CEA), ICAM-1, HLA klasse I-positiv
- Produkter
- Transforming growth factor beta 1 (TGF beta-1, 83 pg per 10 exp6-celler per 24 timer)
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Såtetthet
- 1 x 104 celler/cm2
- Væskefornyelse
- Hver tredje dag
- Gjenoppretting etter tining
- Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 63 år
- Etnisitet
- Kaukasisk
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja