LS513

A linha celular LS513 é um modelo bem caracterizado de carcinoma colorretal derivado de uma biópsia de tumor primário realizada em 1985 num paciente caucasiano de 63 anos. O tumor foi classificado como carcinoma cecal secretor de mucina Dukes C localizado na válvula de Bauhin. As células LS513 são aderentes por natureza e demonstraram resistência a múltiplas drogas (MDR), tornando-as um modelo valioso para o estudo dos mecanismos de resistência a medicamentos no cancro colorretal. Estas células exibem uma eficiência de formação de colónias de 30% em metilcelulose e são tumorigénicas em ratos nude, validando ainda mais a sua utilização em estudos oncogénicos.

Ao nível genético, as células LS513 expressam várias características notáveis. São positivas para o oncogene p53 de tipo selvagem e expressam o antígeno carcinoembrionário (CEA) em aproximadamente 50% das células. Além disso, as células LS513 expressam antigénios do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I, incluindo HLA e beta 2 microglobulina, mas não possuem antigénios MHC de classe II (HLA-DR, DQ e DP). As células também produzem fator de crescimento transformador beta 1 (TGF beta-1) a uma taxa de 83 pg por 10⁶ células por 24 horas. Notavelmente, o TGF beta-1 atua como um inibidor da proliferação celular LS513, enquanto o TGF beta-2 não tem efeito significativo no seu crescimento. Em comparação com a linha celular LS1034, as células LS513 são 100 vezes menos sensíveis ao TGF beta-1, indicando respostas distintas à sinalização do fator de crescimento entre estes dois modelos de carcinoma colorretal.

As células LS513 exibem um perfil único de expressão de antígenos, com forte positividade para a molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1) e antígenos HLA classe I. A ausência de expressão do antígeno MHC classe II é particularmente digna de nota, pois sugere potenciais mecanismos de evasão imunológica que podem ser relevantes para a progressão e metástase do cancro colorretal. Estas características, juntamente com a sua resistência a múltiplos fármacos e a sua capacidade de formar tumores em ratos imunocomprometidos, tornam as células LS513 uma ferramenta poderosa para estudar as bases moleculares e celulares do cancro colorretal, especialmente no contexto das interações imunológicas e da resistência terapêutica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia