LS513

LS513-solulinja on hyvin karakterisoitu kolorektaalisyövän malli, joka on peräisin vuonna 1985 63-vuotiaalta valkoihoiselta miespotilaalta otetusta primaarisen kasvaimen biopsiasta. Kasvain luokiteltiin Dukesin C-luokan musiinia erittäväksi umpisuolen syöväksi, joka sijaitsi Bauhinin venttiilissä. LS513-solut ovat luonteeltaan adheesiivisia ja niillä on osoitettu olevan monilääkeresistenssi (MDR), mikä tekee niistä arvokkaan mallin kolorektaalisyövän lääkeresistenssimekanismien tutkimiseen. Nämä solut osoittavat 30 %:n kolonianmuodostustehokkuuden metyyliselluloosassa ja ovat tuumorigeenisiä alastomissa hiirissä, mikä vahvistaa niiden käyttöä onkogeenisissä tutkimuksissa.

Geneettisellä tasolla LS513-soluilla on useita merkittäviä ominaisuuksia. Ne ovat positiivisia p53-villityyppiselle onkogeenille ja ilmentävät karsinoembryonaalista antigeeniä (CEA) noin 50 %:ssa soluista. Lisäksi LS513-solut ilmentävät päähistokompatibiliteettikompleksin (MHC) luokan I antigeenejä, mukaan lukien HLA ja beeta 2-mikroglobuliini, mutta niiltä puuttuu MHC-luokan II antigeenit (HLA-DR, DQ ja DP). Solut tuottavat myös transformoivaa kasvutekijää beeta 1 (TGF beeta-1) nopeudella 83 pg per 10⁶ solua per 24 tuntia. Erityisesti TGF-beeta-1 toimii LS513-solujen proliferaation estäjänä, kun taas TGF-beeta-2:lla ei ole merkittävää vaikutusta niiden kasvuun. Verrattuna LS1034-solulinjaan LS513-solut ovat 100-kertaisesti vähemmän herkkiä TGF-beeta-1:lle, mikä osoittaa erilaista vastetta kasvutekijän signalointiin näiden kahden kolorektaalisen karsinooman mallin välillä.

LS513-soluilla on ainutlaatuinen antigeenien ilmentymisprofiili, jossa on voimakas positiivisuus solujen välisen adheesiomolekyylin 1 (ICAM-1) ja HLA-luokan I antigeenien suhteen. MHC-luokan II antigeenien ilmentymisen puuttuminen on erityisen huomionarvoista, koska se viittaa mahdollisiin immuunivasteen kiertämismekanismeihin, jotka voivat olla merkityksellisiä kolorektaalisen syövän etenemisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen kannalta. Nämä ominaisuudet, yhdessä niiden resistenssin kanssa useille lääkkeille ja niiden kyvyn muodostaa kasvaimia immuunipuutteisissa hiirissä, tekevät LS513-soluista tehokkaan työkalun kolorektaalisen syövän molekyyli- ja solutason mekanismien tutkimiseen, erityisesti immuunivasteiden vuorovaikutuksen ja terapeuttisen resistenssin kontekstissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa